【摘 要】
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目的在急性分离SD大鼠心室肌细胞上,检测Ca2+电流(ICa)和Ca2+浓度[Ca2+]i的变化。方法改良Langendroff法,用含胶原酶I(1750U/mL)和蛋白酶ⅩⅣ(0.28mg/mL)的无Ca2+台氏液经大
【机 构】
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福建医科大学生理学与病理生理学系,福建医科大学神经生物学研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(C010703);福建省自然科学基金资助项目(C0620002)
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目的在急性分离SD大鼠心室肌细胞上,检测Ca2+电流(ICa)和Ca2+浓度[Ca2+]i的变化。方法改良Langendroff法,用含胶原酶I(1750U/mL)和蛋白酶ⅩⅣ(0.28mg/mL)的无Ca2+台氏液经大鼠主动脉循环灌流法,急性分离大鼠心室肌细胞;采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞的ICa,动态细胞荧光成像技术检测心室肌细胞[Ca2+]i的变化。结果在20min内新鲜分离大鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术可记录电刺激引起心室肌细胞的ICa,1μmol/L异丙肾上腺素可显著增加ICa;并观察到心室肌细胞[Ca2+]i以及电刺激增强[Ca2+]i的效应。结论大鼠心室肌细胞急性分离方法简便实用,所分离的心室肌细胞形态和功能正常,适用全细胞膜片钳和动态细胞荧光成像技术检测实验。
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