探讨溴芬酸钠滴眼液对碱烧伤诱导的大鼠角膜新生血管(CNV)的抑制作用。
方法健康清洁级成年雄性SD大鼠192只，任意取172只大鼠通过碱烧伤法建立右眼CNV模型，按照随机数字表法分为CNV组、模型对照组、溴芬酸钠组和氟米龙组，每组43只大鼠43只眼，其余20只大鼠40只眼为正常对照组，不做任何处理。模型对照组、溴芬酸钠组和氟米龙组于造模后第1天分别给予PBS、溴芬酸钠滴眼液及0.1%氟米龙滴眼液连续点眼21 d。造模后每日裂隙灯显微镜下观察各组大鼠角膜、前房及CNV生长情况，并于造模后1、3、7、14、21、28 d行裂隙灯显微镜照相，计算CNV面积比率；于造模后7、14、28 d每组制作眼球石蜡切片，行苏木精－伊红染色及免疫组织化学染色，检测角膜中CD45及血管内皮生长因子(VEGF)-A的表达；取实验眼角膜组织，采用实时荧光定量PCR法检测角膜组织中环氧合酶(COX)-2及VEGF mRNA含量，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测角膜组织中COX-2及VEGF蛋白含量。
结果造模后1 d，各模型组角膜水肿、混浊；造模后7 d，角膜水肿持续加重；造模后14 d，角膜混浊、水肿程度逐渐减轻；造模后28 d，CNV组、模型对照组有白斑形成，溴芬酸钠组和氟米龙组有角膜云翳。造模后7、14、21、28 d，溴芬酸钠组和氟米龙组CNV面积比率均较CNV组和模型对照组低，差异均有统计学意义(均P<0.05)；各时间点溴芬酸钠组与氟米龙组CNV面积比率比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。组织病理学染色及免疫组织化学染色显示，造模后7 d，各模型组角膜上皮变薄，基质层水肿增厚，胶原纤维排列紊乱，VEGF-A阳性表达；仅CNV组及模型对照组存在少量CD45阳性炎性细胞浸润。造模后14 d、28 d，各组角膜上皮角化，基质水肿逐渐减轻，均未见炎性细胞浸润，CNV组、模型对照组角膜中央可见CNV。荧光定量PCR结果显示，造模后7 d，CNV组、模型对照组角膜COX-2及VEGF mRNA相对表达量均明显高于正常对照组、溴芬酸钠组和氟米龙组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。ELISA检测结果显示，造模后7 d、14 d，溴芬酸钠组COX-2及VEGF蛋白表达量明显低于CNV组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型对照组和溴芬酸钠组角膜穿孔发生率均为10%(1/10)，氟米龙组角膜穿孔发生率达30%(3/10)，各造模组前房积血发生率为10%～30%。
结论溴芬酸钠滴眼液可抑制大鼠碱烧伤后CNV的形成与发展，这一作用可能是通过调节COX-2表达、减轻炎症反应和抑制VEGF产生介导的。