甲状旁腺素受体真核表达载体的构建及稳定转染HEK293细胞系的建立

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heheaixixi
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目的 构建小鼠甲状旁腺素受体(PTHR)及其突变受体(DSEL)全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达PTHR及DSEL的HEK293细胞系,以应用于甲状旁腺素(PTH)模拟肽活性药物筛选及其信号通路的研究。方法 通过双酶切、胶回收方法分别纯化目的片段(PTHR、DSEL基因)和质粒pcDNA3.1(+),二者分别由 DNA限制性内切酶EcoRⅠ与Not Ⅰ双酶切,经 T4DNA Ligase连接的方法将PTHR、DSEL基因克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(+)中,采用测序方法及 DNA限制性内切酶
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