人脂肪干细胞复合猪小肠黏膜下层脱细胞基质/壳聚糖温敏凝胶体内构建组织工程脂肪的研究

来源 :中国修复重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yl198710310318
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目的探讨人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)与猪小肠黏膜下层脱细胞基质微粉(small intestinal submucosa powder,SISP)/壳聚糖温敏水凝胶复合构建组织工程脂肪的可行性。方法取乳癌患者自愿捐赠脂肪组织,Ⅰ型胶原酶消化分离h ADSCs。取第3代细胞与SISP/壳聚糖温敏水凝胶混匀,制成浓度为1×106个/m L的液态凝胶。将24只5周龄健康雌性裸鼠随机分为实验组及对照组(n=12),于颈背部皮下分别注射1 m L h ADSCs+SISP/壳聚糖温敏水凝胶或SISP/壳聚糖温敏水凝胶。注射后0、1、2、4、8周测量植入物体积,评价其降解情况;注射后1、2、4、8周两组各处死3只裸鼠,大体观察后取材行组织学及免疫组织化学染色观察,评价植入物成分构成变化(HE染色)、成脂能力(油红O染色)、血管形成情况(CD31标记)及材料内h ADSC存活分化(人波形蛋白标记)。结果注射后随时间延长,两组植入物均逐渐缩小;但各时间点实验组植入物体积均大于对照组,且8周时差异有统计学意义(t=3.348,P=0.029)。大体观察示各时间点两组植入物均边界清楚、无粘连,至8周时均可见黄色新生组织,且表面有毛细血管包裹。组织学观察示,注射后植入物结构逐渐变紧密,SISP逐渐降解,且实验组降解速度较对照组慢,脂肪逐渐形成,至8周时实验组中央出现少量成熟脂肪组织;各时间点实验组油红O染色阳性面积均大于对照组,且8周时差异有统计学意义(t=3.411,P=0.027)。免疫组织化学染色示,各时间点实验组均有h ADSCs存活;植入物有新生血管生成,2周时达峰值,各时间点两组CD31阳性面积比较差异无统计学意义(P>0.05),但实验组植入物中血管化更均匀。结论 SISP/壳聚糖温敏水凝胶可作为载体,复合h ADSCs植入裸鼠体内后可构建组织工程脂肪。
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