HPV16 E7“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达特性研究

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目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7基因的“自杀性”DNA疫苗,并研究其体外表达能力及诱导细胞凋亡作用。方法以pET32/E7质粒为模板,用PCR方法扩增HPV16 E7基因,构建真核表达重组质粒pSCA/E7,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,将重组质粒转染BHK-21细胞,然后用免疫荧光技术检测HPV16 E7在细胞中的表达,用dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)进行染色检测其诱导细胞凋亡作用。结果PCR扩增得到约400bp的目的基因片段,测序结果与GenBank中的东亚型HPV16 E7基因
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