【摘 要】
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目的:通过体外传代培养,将我国HIV-1药物敏感毒株诱导为拉米夫定耐药毒株.方法:在MT4细胞-中国HIV-1B亚型CNHN24毒株培养系统中加入0.008 μ mol/L拉米夫定,逐渐增加药物浓度进行传代和培养,每隔3-5代测定半数抑制浓度IC50,并用RT-PCR法扩增pol区基因,进行基因型耐药性分析.将表型和基因型耐药结果与敏感株进行比较.结果:培养6代后,IC50由野生毒株的0.018μ
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
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目的:通过体外传代培养,将我国HIV-1药物敏感毒株诱导为拉米夫定耐药毒株.方法:在MT4细胞-中国HIV-1B亚型CNHN24毒株培养系统中加入0.008 μ mol/L拉米夫定,逐渐增加药物浓度进行传代和培养,每隔3-5代测定半数抑制浓度IC50,并用RT-PCR法扩增pol区基因,进行基因型耐药性分析.将表型和基因型耐药结果与敏感株进行比较.结果:培养6代后,IC50由野生毒株的0.018μmol/L逐渐提高到0.15μmol/L;第7代时,IC50突然增加到大于2048μmol/L;pol区的184位氨基酸由甲硫氨酸(M)突变为异亮氨酸(Ⅰ).去除药物继续培养5代,IC50仍维持＞2048μmol/L,pol区184位氨基酸仍为异亮氨酸,没有发生回复突变.结论:在国内首次用中国HIV-1毒株诱导培育成功可稳定传代的3TC耐药株,可用于HIV-1耐药性的研究和HIV-1药物的药效学评价.
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