【摘 要】
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根据U.Washington发表的根癌土壤农杆菌(Agribacterium tumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计一对引物含Nco Ⅰ、SalⅠ酶切位点,利用PCR的方法,扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒
【机 构】
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新疆兵团绿洲生态重点实验室生物技术中心
【基金项目】
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黑龙江省部级项目(编号:NKB025DXNK01SW)
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根据U.Washington发表的根癌土壤农杆菌(Agribacterium tumefaciens)C58Ti质粒基因序列,设计一对引物含Nco Ⅰ、SalⅠ酶切位点,利用PCR的方法,扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区蛋白Virl2基因,连接T载体经测序与发表的序列同源性达l00%.将目的片段从T载体上切下,连接至原核表达载体PET-30a上,转化E.coliDH5α,筛选出阳性克隆,提质粒转化E.coli BL2l,用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳,发现与对照比较在近50kD处有特异
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