【摘 要】
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应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因,并按相应的阅读框架克隆入表达载体pGEX-4T中谷胱甘肽S-转移酶(GST)的下游。重组质粒转化大肠杆菌Rosetta株,分别在1.0mmol/LIPTG、37℃和0.1m
【机 构】
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中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,沈阳农业大学畜牧兽医学院,吉林农业大学动物科技学院
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应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因,并按相应的阅读框架克隆入表达载体pGEX-4T中谷胱甘肽S-转移酶(GST)的下游。重组质粒转化大肠杆菌Rosetta株,分别在1.0mmol/LIPTG、37℃和0.1mmol/L IPTG、28℃条件下诱导,蚓激酶成熟肽-GST融合蛋白获得了高效表达,且后者得到了可溶性蛋白。经SDS-PAGE证实所表达的融合蛋白产物相对分子量与预期的53kD相符。并且以等电点和亲和层析的方法对表达出的可溶性蛋白进行了纯化。
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