目的建立高效液相色谱-荧光检测法测定α-生育酚的方法。方法建立高效液相色谱-荧光检测法,采用Merck Li Chrosorb Si60(4×250 mm,5μm)硅胶柱、荧光检测器,以0.75%异丙醇的正己烷溶液为流动相,考察方法专属性、线性关系、检测限与定量限、精密度、加样回收率、稳定性,并与高效液相色谱-紫外检测法进行灵敏度比较;检测ω-3羧酸胶囊、维生素A棕榈酸酯和维生素E中α-生育酚含量,与高效液相色谱-紫外检测法检测结果进行比较。结果建立的高效液相色谱-荧光检测法中α、β、γ和δ-生育酚分离良好,在3~30μg/m L呈良好的线性关系(r=0.999 8);信噪比约为1∶10,定量限为0.15μg/m L;信噪比约为1∶3,检测限为0.05μg/m L;添加ω-3羧酸、维生素A棕榈酸酯、维生素E,加样回收率分别为(98.7±1.4)%、(97.6±0.8)%、(99.5±2.3)%(n=9);精密度、稳定性均符合要求;荧光检测器较紫外检测器灵敏度高3~5倍,且受其它主药成分干扰小;应用两种方法检测的3种产品中α-生育酚含量相近。结论该方法灵敏、准确、简便,专属性好,可用于测定多种脂溶性药物中α-生育酚的含量。