【摘 要】
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目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-Cde)对顺铂耐药株肺癌A549/DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法
【机 构】
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湖北医药学院附属太和医院检验科; 十堰市中医院检验科; 贵阳医学院检验系;
【基金项目】
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湖北医药学院优秀中青年科技创新团队资助项目(ZD2012015)
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目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-Cde)对顺铂耐药株肺癌A549/DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法 A549细胞(A549细胞组)、A549/DDP细胞(A549/DDP组)、A549/DDP细胞5、10、20μmol/L 5-Aza-Cde组,分别采用甲基化特异性PCR检测细胞hMLH1、MGMT基因甲基化状态,反转录-PCR法检测用药前、后细胞hMLH1mRNA、MGMT mRNA表达情况。结果A549细胞组hMLH1基因呈非甲基化状态且高表达,MGMT呈部分甲基化状态且高表达,A549-DDP细胞组hMLH1、MGMT基因均呈高甲基化状态,mRNA表达下调,10、20μmol/L 5-Aza-Cde组hMLH1和MGMT均呈非甲基化状态;A549/DDP细胞组、5μmol/L 5-Aza-Cde组hMLH1mRNA与MGMT mRNA表达量均低于A549细胞组(P<0.05),20μmol/L 5-Aza-Cde组与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0.05);10μmol/L 5-Aza-Cde组MGMT mRNA表达量低于A549细胞组(P<0.05),hMLH1mRNA表达量与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hMLH1、MGMT基因甲基化修饰程度与mRNA表达有一定相关性,hMLH1、MGMT基因甲基化可能是肺癌A549细胞对顺铂耐药的因素之一。
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