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【摘要】文论述了SysmexCA700型全自动血凝仪的技术特点;分析了仪器的检测原理和结构功能;简述了临床常规项目及应用,便于大家了解血凝仪。
【关键词】全自动血凝仪;结果;临床应用
随着医学科学的发展,人们对止血和血栓发生和发展的认识越来越深刻[1],止血和血栓的研究是一门新兴边缘学科,它涉及到临床多种疾病的发生和发展,并与临床治疗和预后有密切的关系,因此临床要求进行止血和血栓方面检查的样品和项目越来越多,这些检查项目广泛应用于出血、血栓性疾病及血栓前状态的诊断、疗效观察、抗凝药物剂量和预后分析。而传统的手工方法和单一的凝固定性检查已经远远不能满足临床要求;SysmexCA7000型全自动血凝仪的应用,使得止血和血栓项目检查变得简便、准确,可做出多项精确的定量结果。
1仪器的检测原理和基本方法
全自动血凝仪一般是使用生物学检测方法,也称为凝固法、还有免疫学方法及生物化学方法。目前血凝仪使用的生物学方法大致分成三类:电流法、粘度法、光学法。
1.1电流法该法是利用待检的血浆标本的纤维蛋白具有导电性,将电极插入标本中,利用两电极之间的电流的通、断来判断纤维蛋白是否形成,以此确定凝固终点。
1.2粘度法该法又称磁珠法;仪器的检测部分有独立的线圈产生所需的电磁场,检测时在待检标本中加入小磁珠,利用变化的磁场使小磁珠产生运动,随着血浆的凝固,血浆粘稠度增加,小磁珠摆幅逐渐减少,仪器内的电磁传感器,测定小磁珠的不同振荡幅度,计算出血浆的凝固时间。
1.3光学法该法是目前血凝仪使用最多的一种检测方法。当血浆在样品杯中逐渐凝固时,纤维蛋白原转变成纤维蛋白,其理学性状也随着变化;当一束光通过样品杯时,其透射光和散射光的强度也会随之发生变化。所谓光学法就是血凝仪根据血液凝固而导致的光强度的变化,检测吸光度值(A)来判断血浆凝固终点的方法。免疫学方法是以血浆中要检测的物质作为抗原,而试剂中带有相应的抗体,利用标本中的抗原和试剂中的抗体发生特异性结合反应,对标本中待测物质进行定量分析。凝血实验应用的免疫方法很多,如免疫电泳、免疫扩散法和免疫比浊法等。而全自动血凝仪一般采用免疫比浊法。免疫比浊法可分直接浊度分析和乳胶比浊。直接浊度分析有透射光比浊和散射光比浊两种。透射光比浊是指血凝仪光源部分产生的单色光通过待检血浆时,在标本中加入试剂后,抗原和抗体反应就会形成复合物颗粒,使得待检标本的浊度增加,则透过的光强度会减弱。光强度发生改变的程度与抗原的量成一定的数量关系,仪器中的电脑根据这种数量关系,控制将透射光强度变化值通过光电管转变成相应的电信号,并计算出抗原的精确数值。散射光比浊是指血凝仪光源的光通过待检标本时,抗原和抗体反应产生的复合物,其标本中产生较大的颗粒。光散射增强;散射光强度的变化与抗原成一定的数量关系,由这一关系,可准确求知标本中抗原的量。乳胶比浊法是将血浆中要检测的物质相对应的抗体包被在直径为15—60砌的乳胶颗粒上;使得抗原和抗体复合物的体积增大,通过光源比浊时,透射光和散射光的强度值改变增大,提高检测的灵敏度。生物化学方法是通过测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量;该法是以酶学方法为基础的直接定量法,对凝血、抗凝、纤溶系统各物质含量的测定结果准确、重复性好、并且所需样品量少。仪器使用的试剂是人工合成的某种活性酶裂解位点的化合物,且化合物连接上产色物质,待检血浆中含有活性酶,在检测过程中产色物质可被解离下来,使被检样品中出现颜色变化,仪器的光路系统根据此颜色变化检测出吸光度(A)的变化值,根据酶活性与吸光度值变化及所检测物质含量间的一定数量关系,计算电路可推算出被检标本某物质的含量。产色物质一般选用硝基苯胺(PNA);、游离的PNA呈黄色。在柏5舢波长下PNA有特定的吸收峰;吸光度值变化最大。具体检测方法可采用终点法或动态法;终点法是在活性酶同产色物质作用一段时间后,加入乙酸终止反应,仪器检测此段时间的吸光度的变化,采集数据,计算出待测物质的含量。动态法就是连续采集样品吸光度变化值,由CPU电路计算出单位时间内吸光度的变化量,并以每分钟吸光度的变化来报告原始数据,通过换算得出所需的检验结果。全自动血凝仪一般采用动态法,其检测结果更加准确[2]。
2结果
自动凝血分析仪的发展虽取得了可喜的进展,但是其发展仍受到不少因素的制约,例如N自动凝血仪检测项目目前大多是基于活性或时间测定,而定量的参数仍较少,检测项目的影响因素较多外,很多试验尚未标准化,而且很多项目尚缺乏国际公认的标准参考品,很多检测项目包括HL在内仍缺乏参考方法,还有很多止凝血和纤溶系统的分子标志物尚未实现自动分析等等,相信随着自动血凝仪检测方法及试剂的不断完善$临床应用不断深入,将会有力地提高我国血栓性疾病的防治水平[3]。
参考文献
[1]郭健.临床实验室的管理与发展[J].中华医学检验杂志,2004,27(1):49,51.
[2]丛玉隆.临床实验室分析前质量管理及对策[J].中华医学检验杂志,2004,27(8):483—487.
[3] .夏恩兰.全自动血凝仪结果的判读及其临床应用[J].中华妇产科杂志,1997,32(5):259.
【关键词】全自动血凝仪;结果;临床应用
随着医学科学的发展,人们对止血和血栓发生和发展的认识越来越深刻[1],止血和血栓的研究是一门新兴边缘学科,它涉及到临床多种疾病的发生和发展,并与临床治疗和预后有密切的关系,因此临床要求进行止血和血栓方面检查的样品和项目越来越多,这些检查项目广泛应用于出血、血栓性疾病及血栓前状态的诊断、疗效观察、抗凝药物剂量和预后分析。而传统的手工方法和单一的凝固定性检查已经远远不能满足临床要求;SysmexCA7000型全自动血凝仪的应用,使得止血和血栓项目检查变得简便、准确,可做出多项精确的定量结果。
1仪器的检测原理和基本方法
全自动血凝仪一般是使用生物学检测方法,也称为凝固法、还有免疫学方法及生物化学方法。目前血凝仪使用的生物学方法大致分成三类:电流法、粘度法、光学法。
1.1电流法该法是利用待检的血浆标本的纤维蛋白具有导电性,将电极插入标本中,利用两电极之间的电流的通、断来判断纤维蛋白是否形成,以此确定凝固终点。
1.2粘度法该法又称磁珠法;仪器的检测部分有独立的线圈产生所需的电磁场,检测时在待检标本中加入小磁珠,利用变化的磁场使小磁珠产生运动,随着血浆的凝固,血浆粘稠度增加,小磁珠摆幅逐渐减少,仪器内的电磁传感器,测定小磁珠的不同振荡幅度,计算出血浆的凝固时间。
1.3光学法该法是目前血凝仪使用最多的一种检测方法。当血浆在样品杯中逐渐凝固时,纤维蛋白原转变成纤维蛋白,其理学性状也随着变化;当一束光通过样品杯时,其透射光和散射光的强度也会随之发生变化。所谓光学法就是血凝仪根据血液凝固而导致的光强度的变化,检测吸光度值(A)来判断血浆凝固终点的方法。免疫学方法是以血浆中要检测的物质作为抗原,而试剂中带有相应的抗体,利用标本中的抗原和试剂中的抗体发生特异性结合反应,对标本中待测物质进行定量分析。凝血实验应用的免疫方法很多,如免疫电泳、免疫扩散法和免疫比浊法等。而全自动血凝仪一般采用免疫比浊法。免疫比浊法可分直接浊度分析和乳胶比浊。直接浊度分析有透射光比浊和散射光比浊两种。透射光比浊是指血凝仪光源部分产生的单色光通过待检血浆时,在标本中加入试剂后,抗原和抗体反应就会形成复合物颗粒,使得待检标本的浊度增加,则透过的光强度会减弱。光强度发生改变的程度与抗原的量成一定的数量关系,仪器中的电脑根据这种数量关系,控制将透射光强度变化值通过光电管转变成相应的电信号,并计算出抗原的精确数值。散射光比浊是指血凝仪光源的光通过待检标本时,抗原和抗体反应产生的复合物,其标本中产生较大的颗粒。光散射增强;散射光强度的变化与抗原成一定的数量关系,由这一关系,可准确求知标本中抗原的量。乳胶比浊法是将血浆中要检测的物质相对应的抗体包被在直径为15—60砌的乳胶颗粒上;使得抗原和抗体复合物的体积增大,通过光源比浊时,透射光和散射光的强度值改变增大,提高检测的灵敏度。生物化学方法是通过测定产色物质的吸光度变化来推算所测定物质的含量;该法是以酶学方法为基础的直接定量法,对凝血、抗凝、纤溶系统各物质含量的测定结果准确、重复性好、并且所需样品量少。仪器使用的试剂是人工合成的某种活性酶裂解位点的化合物,且化合物连接上产色物质,待检血浆中含有活性酶,在检测过程中产色物质可被解离下来,使被检样品中出现颜色变化,仪器的光路系统根据此颜色变化检测出吸光度(A)的变化值,根据酶活性与吸光度值变化及所检测物质含量间的一定数量关系,计算电路可推算出被检标本某物质的含量。产色物质一般选用硝基苯胺(PNA);、游离的PNA呈黄色。在柏5舢波长下PNA有特定的吸收峰;吸光度值变化最大。具体检测方法可采用终点法或动态法;终点法是在活性酶同产色物质作用一段时间后,加入乙酸终止反应,仪器检测此段时间的吸光度的变化,采集数据,计算出待测物质的含量。动态法就是连续采集样品吸光度变化值,由CPU电路计算出单位时间内吸光度的变化量,并以每分钟吸光度的变化来报告原始数据,通过换算得出所需的检验结果。全自动血凝仪一般采用动态法,其检测结果更加准确[2]。
2结果
自动凝血分析仪的发展虽取得了可喜的进展,但是其发展仍受到不少因素的制约,例如N自动凝血仪检测项目目前大多是基于活性或时间测定,而定量的参数仍较少,检测项目的影响因素较多外,很多试验尚未标准化,而且很多项目尚缺乏国际公认的标准参考品,很多检测项目包括HL在内仍缺乏参考方法,还有很多止凝血和纤溶系统的分子标志物尚未实现自动分析等等,相信随着自动血凝仪检测方法及试剂的不断完善$临床应用不断深入,将会有力地提高我国血栓性疾病的防治水平[3]。
参考文献
[1]郭健.临床实验室的管理与发展[J].中华医学检验杂志,2004,27(1):49,51.
[2]丛玉隆.临床实验室分析前质量管理及对策[J].中华医学检验杂志,2004,27(8):483—487.
[3] .夏恩兰.全自动血凝仪结果的判读及其临床应用[J].中华妇产科杂志,1997,32(5):259.