表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lw10251

【摘要】

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为构建表达籽鹅α-烯醇化酶（ENO1）基因的重组腺病毒，本研究利用RT-PCR技术，从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因，克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中，并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框

【作者】

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计红王江璐张伟宏郭景茹杨焕民柳巨雄李士泽孔凡志

【机构】

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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,吉林大学畜牧兽医学院

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2013年1期

【关键词】

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α-烯醇化酶重组腺病毒颗粒细胞 ENO1 recombinant adenovirus granular cell

【基金项目】

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黑龙江省自然科学基金重点项目（ZD20116）

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为构建表达籽鹅α-烯醇化酶（ENO1）基因的重组腺病毒，本研究利用RT-PCR技术，从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因，克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中，并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框切下，连接到腺病毒骨架的pAdxsi载体中。采用PacI酶切，将其线性化，并转染至293（R）细胞进行病毒的包装，制备重组腺病毒。实验结果显示，制备的表达ENO1重组腺病毒的滴度达到1．1×10^11pfu／mL。将重组腺病毒感染籽鹅卵泡颗粒细胞后，荧光定量RT-PCR与western

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