人白介素10重组腺相关病毒血清型2/1杂合载体的构建及转导供肝的效果

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目的:构建含人白介素10(hIL-10)的腺相关病毒血清型2/1杂合载体(AAV2/1),并观察其在供肝移植物中的表达. 方法:采用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增hIL-10cDNA,将其克隆至pMD18-T载体中,测序后,再经酶切定向插入真核表达载体pSNAV,用脂质体介导转染BHK21细胞,经G418筛选得到含ITR-hIL-10-ITR的BHK21细胞株,用携带rep2-cap1基因的辅助病毒(rHSV/r2c1)感染该细胞株.通过细胞孵育、裂解和病毒纯化,得到含hIL-10的AAV2/1
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