【摘 要】目的：通过HGPRT基因突变试验研究川奇消食化积口服液的致突变性。方法：在代谢活化及非代谢活化条件下，进行川奇消食化积口服液中国仓鼠肺细胞株（V79）HGPRT基因突变试验，测定HGPRT基因位点突变频率。结果：与阴性对照组比，受试物四个剂量组在代谢活化及非代谢活化条件下均未产生细胞毒性，HGPRT基因位点突变频率未见明显升高。结论：川奇消食化积口服液不引起小鼠中国仓鼠肺细胞株（V79）HGPRT基因位点突变。
　　【关键词】川奇消食化积口服液；中国仓鼠肺细胞株；HGPRT基因突变
　　【中图分类号】R917 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）11—0064—02
　　哺乳动物细胞HGPRT基因突变试验具有快速、灵敏、可靠、可检测遗传学改变等优点，广泛应用于检测外来化合物引起的突變，包括碱基对突变、移码突变和缺失等，从而评价保健食品引起突变的可能性[1]。本文通过HGPRT基因突变试验，研究川奇消食化积口服液的致突变性，现报道如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 细胞株
　　中国仓鼠肺细胞株（V79）（中国科学院上海细胞生物研究所），培养液采用含10%胎牛血清和适量抗菌素的DMEM培养基，5%CO2、37?C 及饱和湿度下作常规培养。
　　1.2 试剂
　　川奇消食化积口服液（南昌川奇保健品有限公司），苯并芘（Dr. Ehrenstorfer GmbH），丝裂霉素C（Sigma），6-硫代鸟嘌呤（Sigma），DMEM培养基（Hyclone），胎牛血清（Gibco），S9（Moltox），Giemsa染液（Sigma）。
　　1.3 剂量设定
　　预试验结果表明，受试物溶解性良好，对培养系统pH值没有影响，原液按照1%体积接触V79细胞，未产生明显细胞毒性。故以原液作为最高浓度向下设置三个剂量组，即1/2原液、1/4原液、1/8原液，同时设阴性对照（溶剂对照）组及阳性对照组。
　　1.4 试验方法
　　取已去除自发性突变且生长状态良好的V79细胞，接种于平皿中（5×105个/皿）。培养24小时后，在非代谢活化条件（-S9）及代谢活化条件（+S9）两种情况下进行试验：受试物组按照1%体积比加入受试物；阴性对照组加入等体积的DMEM培养基；阳性对照组-S9条件下加入MMC （终浓度0.3 μg/ml）、+S9条件下加入BaP（终浓度1 μg/ml）。接触3小时后，消化、离心、重悬，调整终密度至5×104/ml。
　　1.4.1细胞毒性测定
　　取密度为5×104/ml的细胞悬液，梯度稀释至20个/ml，每个剂量组接种5个平皿中（每皿10 ml，200个细胞/皿），培养7天后，Giemsa染色，统计每皿集落数，计算相对集落形成率。
　　3 讨论
　　我国对化合物（包括食品污染物、药物、化妆品等）的常规遗传毒性评价方法包括：①细菌试验（Ames试验）；②哺乳动物体细胞突变试验、小鼠骨髓细胞微核试验、染色体畸变试验；③哺乳类生殖细胞突变试验[2]。
　　细胞在正常培养条件下，对6-TG的毒性作用敏感，不能生存。在致癌物和/或致突变物的作用下，某些细胞X染色体上控制HGPRT的结构基因发生突变，不能产生HGPRT，表现出对6-TG的抗性。这些突变细胞在含有6-TG的选择性培养基中能够继续分裂并形成集落，根据突变集落形成数，可判定受试物的致突变性[1]。本文通过HGPRT基因突变试验，研究川奇消食化积口服液的致突变性。结果表明，按1%体积比给药，受试物原液、1/2原液、1/4原液、1/8原液四个剂量组均未产生细胞毒性，在活化状态及非活化状态下均不具有致突变性。
　　参考文献：
　　[1] 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范[S].2003.
　　[2] ICH. S2 （R1）： Guidance on genotoxicity testing and data interpretation for phar- maceuticals intended for human use[S]. 2008.