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[摘要]目的：探究散瘀止痛散的药品质量标准。方法：通过显微鉴别、薄层色谱鉴别散瘀止痛散的中药成分，对鉴别过程中的关键步骤进行归纳和总结。结果：应用显微鉴别茯苓、红花、延胡索、白芍和龙血竭特征明显，而应用薄层色谱鉴别白芍、龙血竭、延胡索重复性好。结论：显微鉴别和薄层色谱鉴别散瘀止痛散具有较高的可信度，可用于该药的质量控制。
[关键词]散瘀止痛散;显微鉴别;薄层色谱;质量控制
[中图分类号]R286.0 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）15-0117-01
散瘀止痛散是由多种中药组成的复方制剂，该药为棕褐色粉末，微苦。主药中的延胡索和白芍可利气养血，荣筋活血;臣药中的红花和龙血竭等成分可使活血作用放大，茯苓能够发挥消肿的功效，针对软组织损伤具有很好的治疗效果。为了有效地鉴别该药的质量，本研究通过显微、薄层色谱法定性鉴别该药的组分质量。
1实验材料
1.1样品散瘀止痛散批号为：20180825-1、20180825-2、20180825-3。
1.2对照品龙血竭（批号121252-201801）;延胡索乙素（批号：110726-201806）;延胡索（批号：120928-201808）;芍药苷（批号：110736-201635）;以上药材均取自中国食品药品检定研究院。
1.3实验中所用的薄层板硅胶G预制板、高效G预制板和硅胶GF254预制板均为青岛邦凯高新技术材料公司提供。薄层色谱所用试剂采购至上海阿拉丁试剂公司（分析纯）。
2方法与结果
2.1显微鉴别实验：（1）延胡索：淡黄色或几乎无色，其下皮厚壁细胞呈黄绿色，细胞大多是多角形和长条形，壁稍多弯曲，且个别有增厚，纹孔细而密。螺纹导管半径为8-161ua，但显微特征不明显。
（2）白芍：团块较多，草酸钙簇晶常分布于薄壁细胞中，半径5.5-18um，成行排布，个别细胞中有数个簇晶。具缘纹和网纹导管半径10～32um。纤维有轻微木化现象，壁厚，呈现为长梭形，半径7～18um。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（3）红花：可观察到柱头、花冠和花丝的碎片，导管旁有长管状分泌细胞（带有褐色分泌物），半径30um左右。在花冠碎片顶端的表皮细胞外壁可观察到短绒毛状的突起。柱头和花柱的上部表皮细胞具有圆锥形单细胞毛。花粉粒有3个萌发孔，多为类圆形和椭圆形（半径30um），在其外壁可观察到齿状突起。草酸钙方晶常分布于薄壁细胞中（半径1-3um），而“分泌细胞半径33um左右，伴有棕色分泌物。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（4）龙血竭：呈血红色，为不规则块片，周围液体多由鲜黄色向红色渐变。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（5）茯苓：为无色、不规则的颗粒状或团块状，暴露于水合氯醛液会溶解。菌丝细长且弯曲，个别会有分枝，多为无色或淡棕色，半径1.-4um。特征十分明显，且未见其它干扰项。
2.2显微鉴别小结：白芍、茯苓、龙血竭、红花显微鉴别特征明显。半径5.5-18um，成行排布，个别细胞中有数个簇晶。存在于薄壁细胞中，成行排列，个别细胞中有数个簇晶（白芍）。可见柱头、花冠和花丝的碎片，导管旁有长管状分泌细胞分布（并伴有棕色分泌物），半径30um左右（红花）。呈血红色，为不规则块片，周围液体多由鲜黄色向红色渐变（龙血竭）。无色不规则颗粒状团块状，遇到水合氯醛液会溶解（茯苓）。
2.3薄层鉴别：（1）白芍：①供试品溶液：取3g白芍内容物，将其研细后加入15ml甲醇进行超声处理（5分钟），取其上清液待用。②对照品溶液：加甲醇溶解芍药对照品（1mg/ml）待用。③阴性对照溶液（无白芍）：制备方法同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（5ul）在薄层板上跑板，展开剂体系为氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=40：5：10：0.2，所应用的薄层板为硅胶G板;显色：将5%香草醛硫酸溶液喷涂至薄层板后，在110°C下加热至斑点清晰显色。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
（2）龙血竭：①供试品溶液：取3g龙血竭并加入25ml乙醚进行振摇（5分钟），过滤，待滤液挥干后，往残渣中加入1ml甲醇使其溶解。②对照品溶液：同供试品溶液。③阴性对照溶液（不含龙血竭的样品）：同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（10ul）在薄層板上跑板，展开剂体系为环己烷：乙酸乙酯=5：1，所应用的薄层板为硅胶GF254板;显色：将薄层板置于365nm的UV灯光下进行检查。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的荧光斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
（3）延胡索：①供试品溶液：取10g延胡索并加入25ml甲醇进行超声处理（30分钟），过滤，待滤液挥干后，加10ml水将残渣溶解。用浓氨水使其体系变为碱性，用乙醚摇荡提取3次（每次10m1），合并后将其蒸干，加lml甲醇使残渣溶解，作为供试品溶液。②对照品溶液：加甲醇溶解延胡索乙素对照品（05mg/ml），将其作为对照品溶液。制备对照药材溶液：取0.5g延胡索对照药材，制备方法同供试品溶液，将其作为对照药材溶液。③阴性对照溶液（无延胡索）：制备方法同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（5u1）在薄层板上跑板，展开剂体系为甲苯：丙酮=9：2，所应用的薄层板为高效G板;显色：用碘蒸气熏至可见清晰斑点。将碘蒸干后，将薄层板置于365nm的UV灯光下进行检查。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的荧光斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
3讨论
散瘀止痛散在治疗软组织损伤具有较好的效果，其在消肿止痛方面疗效显著。但是，市场上该药的药品质量良莠不齐，因此，找寻一个行之有效的鉴别方法尤为重要，因此，本研究将显微鉴别和薄层色谱法应用于对该药的组分进行定性鉴别中，以期为市场监管提供科学依据。
本研究结果显示，应用显微鉴别茯苓、红花、延胡索、白芍和龙血竭特征明显，而应用薄层色谱鉴别白芍、龙血竭、延胡索重复性好。
综上所述，显微鉴别和薄层色谱鉴别散瘀止痛散中的具有较高的可信度，可用于该药的质量控制。能够实现对散瘀止痛散药品内在质量进行真伪鉴别和控制，从而可确保该药的内在质量，使病人获得满意的治疗效果。
[关键词]散瘀止痛散;显微鉴别;薄层色谱;质量控制
[中图分类号]R286.0 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2019）15-0117-01
散瘀止痛散是由多种中药组成的复方制剂，该药为棕褐色粉末，微苦。主药中的延胡索和白芍可利气养血，荣筋活血;臣药中的红花和龙血竭等成分可使活血作用放大，茯苓能够发挥消肿的功效，针对软组织损伤具有很好的治疗效果。为了有效地鉴别该药的质量，本研究通过显微、薄层色谱法定性鉴别该药的组分质量。
1实验材料
1.1样品散瘀止痛散批号为：20180825-1、20180825-2、20180825-3。
1.2对照品龙血竭（批号121252-201801）;延胡索乙素（批号：110726-201806）;延胡索（批号：120928-201808）;芍药苷（批号：110736-201635）;以上药材均取自中国食品药品检定研究院。
1.3实验中所用的薄层板硅胶G预制板、高效G预制板和硅胶GF254预制板均为青岛邦凯高新技术材料公司提供。薄层色谱所用试剂采购至上海阿拉丁试剂公司（分析纯）。
2方法与结果
2.1显微鉴别实验：（1）延胡索：淡黄色或几乎无色，其下皮厚壁细胞呈黄绿色，细胞大多是多角形和长条形，壁稍多弯曲，且个别有增厚，纹孔细而密。螺纹导管半径为8-161ua，但显微特征不明显。
（2）白芍：团块较多，草酸钙簇晶常分布于薄壁细胞中，半径5.5-18um，成行排布，个别细胞中有数个簇晶。具缘纹和网纹导管半径10～32um。纤维有轻微木化现象，壁厚，呈现为长梭形，半径7～18um。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（3）红花：可观察到柱头、花冠和花丝的碎片，导管旁有长管状分泌细胞（带有褐色分泌物），半径30um左右。在花冠碎片顶端的表皮细胞外壁可观察到短绒毛状的突起。柱头和花柱的上部表皮细胞具有圆锥形单细胞毛。花粉粒有3个萌发孔，多为类圆形和椭圆形（半径30um），在其外壁可观察到齿状突起。草酸钙方晶常分布于薄壁细胞中（半径1-3um），而“分泌细胞半径33um左右，伴有棕色分泌物。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（4）龙血竭：呈血红色，为不规则块片，周围液体多由鲜黄色向红色渐变。特征十分明显，且未见其它干扰项。
（5）茯苓：为无色、不规则的颗粒状或团块状，暴露于水合氯醛液会溶解。菌丝细长且弯曲，个别会有分枝，多为无色或淡棕色，半径1.-4um。特征十分明显，且未见其它干扰项。
2.2显微鉴别小结：白芍、茯苓、龙血竭、红花显微鉴别特征明显。半径5.5-18um，成行排布，个别细胞中有数个簇晶。存在于薄壁细胞中，成行排列，个别细胞中有数个簇晶（白芍）。可见柱头、花冠和花丝的碎片，导管旁有长管状分泌细胞分布（并伴有棕色分泌物），半径30um左右（红花）。呈血红色，为不规则块片，周围液体多由鲜黄色向红色渐变（龙血竭）。无色不规则颗粒状团块状，遇到水合氯醛液会溶解（茯苓）。
2.3薄层鉴别：（1）白芍：①供试品溶液：取3g白芍内容物，将其研细后加入15ml甲醇进行超声处理（5分钟），取其上清液待用。②对照品溶液：加甲醇溶解芍药对照品（1mg/ml）待用。③阴性对照溶液（无白芍）：制备方法同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（5ul）在薄层板上跑板，展开剂体系为氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸=40：5：10：0.2，所应用的薄层板为硅胶G板;显色：将5%香草醛硫酸溶液喷涂至薄层板后，在110°C下加热至斑点清晰显色。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
（2）龙血竭：①供试品溶液：取3g龙血竭并加入25ml乙醚进行振摇（5分钟），过滤，待滤液挥干后，往残渣中加入1ml甲醇使其溶解。②对照品溶液：同供试品溶液。③阴性对照溶液（不含龙血竭的样品）：同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（10ul）在薄層板上跑板，展开剂体系为环己烷：乙酸乙酯=5：1，所应用的薄层板为硅胶GF254板;显色：将薄层板置于365nm的UV灯光下进行检查。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的荧光斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
（3）延胡索：①供试品溶液：取10g延胡索并加入25ml甲醇进行超声处理（30分钟），过滤，待滤液挥干后，加10ml水将残渣溶解。用浓氨水使其体系变为碱性，用乙醚摇荡提取3次（每次10m1），合并后将其蒸干，加lml甲醇使残渣溶解，作为供试品溶液。②对照品溶液：加甲醇溶解延胡索乙素对照品（05mg/ml），将其作为对照品溶液。制备对照药材溶液：取0.5g延胡索对照药材，制备方法同供试品溶液，将其作为对照药材溶液。③阴性对照溶液（无延胡索）：制备方法同供试品溶液。点样量：以毛细管取上述3种溶液（5u1）在薄层板上跑板，展开剂体系为甲苯：丙酮=9：2，所应用的薄层板为高效G板;显色：用碘蒸气熏至可见清晰斑点。将碘蒸干后，将薄层板置于365nm的UV灯光下进行检查。供试品和对照品在薄层色谱上处于相同高度，显相同颜色和形状的荧光斑点（未见阴性干扰）。以三批不同批次的样品分别检测，具有较好的重现性。
3讨论
散瘀止痛散在治疗软组织损伤具有较好的效果，其在消肿止痛方面疗效显著。但是，市场上该药的药品质量良莠不齐，因此，找寻一个行之有效的鉴别方法尤为重要，因此，本研究将显微鉴别和薄层色谱法应用于对该药的组分进行定性鉴别中，以期为市场监管提供科学依据。
本研究结果显示，应用显微鉴别茯苓、红花、延胡索、白芍和龙血竭特征明显，而应用薄层色谱鉴别白芍、龙血竭、延胡索重复性好。
综上所述，显微鉴别和薄层色谱鉴别散瘀止痛散中的具有较高的可信度，可用于该药的质量控制。能够实现对散瘀止痛散药品内在质量进行真伪鉴别和控制，从而可确保该药的内在质量，使病人获得满意的治疗效果。