【摘 要】
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目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型。方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81170279,81370409);江苏省自然基金及创新团队基金资助项目(BK2011486,LJ201116);镇江市心血管病重点实验室(SS2012002)
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目的:建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型。方法:采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs,经免疫荧光染色法鉴定后,将细胞随机分为对照组和钙化组。采用von kossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量。结果:培养3~5 d时,可见细胞从组织块边缘爬出,7~10 d后细胞融合成片;免疫荧光染色显示胞质表达特异性α-肌动蛋白;VSMCs培养至第2代细胞纯度达95%;与对照组相比,钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性明显增加(P均<0.05)。结论:改良的组织贴块法可获得高纯度的小鼠VSMCs;β-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化。
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