【摘 要】
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目的 观察特异性小干扰RNA (siRNA)沉默Cbl-b基因对于小鼠脾脏T淋巴细胞免疫活性影响.方法 尼龙毛柱法分离T淋巴细胞,加入抗CD3抗体(1 mg/L)在体外模拟T淋巴细胞活化的第一信号,脂质体转染12、24、48 h后,流式细胞仪检测早、中、晚期活化标志分子CD69、CD25、CD71的表达变化；转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒检测T淋巴细胞增殖程度.结果 利用特异性C
【机 构】
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200120上海,同济大学附属东方医院泌尿外科,徐州中心医院,200120上海,同济大学附属东方医院泌尿外科,200120上海,同济大学附属东方医院泌尿外科,200120上海,同济大学附属东方医院泌尿
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目的 观察特异性小干扰RNA (siRNA)沉默Cbl-b基因对于小鼠脾脏T淋巴细胞免疫活性影响.方法 尼龙毛柱法分离T淋巴细胞,加入抗CD3抗体(1 mg/L)在体外模拟T淋巴细胞活化的第一信号,脂质体转染12、24、48 h后,流式细胞仪检测早、中、晚期活化标志分子CD69、CD25、CD71的表达变化；转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)试剂盒检测T淋巴细胞增殖程度.结果 利用特异性Cbl-b siRNA能有效沉默T淋巴细胞Cbl-b基因,转染12 h后,转染组、对照组、空白组CD69分子表达阳性率分别为(46.78±4.89)％、(21.36±2.06)％、(25.09±2.27)％(P＜0.01)；转染24h后,转染组、对照组、空白组CD25分子表达阳性率分别为(19.27±1.84)％、(8.18±0.71)％、(9.25±0.65)％(P＜0.01)；转染48 h后,转染组、对照组、空白组CD71分子表达阳性率分别为(43.26 ±3.89)％、(23.99 ±1.97)％、(28.09 ±2.15)％ (P ＜0.01)；转染48 h后,CCK-8试剂盒检测转染组、对照组、空白组吸光度值分别为0.763±0.063、0.356±0.039、0.383±0.015(P＜0.01).结论 利用特异性小干扰沉默Cbl-b基因能够增强小鼠脾脏T淋巴细胞免疫活性。
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