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黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因克隆及在毕赤酵母中分泌表达

来源 :食品与生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kayak6789

【摘 要】

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为大规模制备β-葡萄糖苷酶,构建重组酵母工程菌,实现β-葡萄糖苷酶的分泌表达。根据已报道黑曲霉(Aspergillus niger)β-葡萄糖苷酶cDNA序列设计一对引物,采用RT-PCR扩增,获

【作 者】

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朱龙宝 汤斌 陶玉贵 葛飞 魏胜华 陈涛 李婉珍 

【机 构】

：

安徽工程大学生化学院

【出 处】

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食品与生物技术学报

【发表日期】

：

2012年9期

【关键词】

：

黑曲霉 Β-葡萄糖苷酶 毕赤酵母 基因克隆 分泌表达 Aspergillus niger β-glucosidase Pichia pastoris GS115 

【基金项目】

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安徽省高校自然科学基金项目(KJ2010B014)

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为大规模制备β-葡萄糖苷酶,构建重组酵母工程菌,实现β-葡萄糖苷酶的分泌表达。根据已报道黑曲霉(Aspergillus niger)β-葡萄糖苷酶cDNA序列设计一对引物,采用RT-PCR扩增,获得黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因(bgl)。构建了pMD-18T-bgl克隆载体,bgl亚克隆到质粒pPIC9K,构建表达载体pPIC9K-bgl。经BglⅡ线性化后电转入Pichia pastoris GS115,经过MD、YPD/G418平板筛选阳性克隆,获得分泌表达重组P.pastoris GS115的工程菌。用

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