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目的：克隆编码耻垢分枝杆菌调节蛋白TrpD的基因并在大肠杆菌中进行蛋白表达及纯化。方法利用PCR技术从耻垢分枝杆菌中扩增TrpD基因，构建重组表达质粒pET－32a（＋）－TrpD；以重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），筛选阳性重组菌株，IPTG诱导目的蛋白表达，在变性条件下对目的蛋白进行镍离子亲和层析纯化，通过SDS－PAGE和Westem blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果扩增了TrpD基因，克隆于表达载体pET－32a（＋）中，PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆，测序证实正确。经诱导在大肠