墨兰B类PI基因多靶点CRISPR/Cas9载体构建

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MADS基因家族对植物成花具有重要作用,在兰花中,目前还没有利用CRIsPR/Cas9进行基因编辑的相关报道。墨兰(Cymbidium sinense)B类PISTILLATA(PI)基因可能与墨兰舌瓣的形成有关,为了进一步验证其PI基因的功能,本研究利用在线软件CRISPR-P设计3个靶点,并采用Overlapping-PCR技术和Golden Gate cloning策略构建了墨兰PI基因CRISPR/Cas9的多重sgRNA载体系统,经PCR、酶切和测序验证,植物编辑载体已构建成功。为在墨兰中实现该
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