血痕中乙型肝炎病毒DNA检测

来源 :中国公共卫生 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimmyreagan
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目的 探讨血痕标本检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)的方法.方法 以血痕标本为检材,采用Chelex-100法制备模板DNA,再以巢氏PCR法扩增HBV目的 片段,建立并优化反应条件,分析该法的特异性与敏感性,并将该法检测乙肝病毒感染者的结果与酶联免疫吸附法(ELISA)的检测结果利用配对X2检验进行比较.结果 Chelex-100法与巢式PCR法相结合的检测方法,可从仅3 mm×3 mm的乙肝病毒感染者血痕标本中扩增出193 bp的HBV-DNA特异片段,最低检出量(灵敏度)为5拷贝/μL;本检测法与ELISA法的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05);2种方法的检测结果一致(Kappa系数=0.727).结论 建立了一种灵敏、特异、检材用量少的检测方法,弥补了常规检测方法需以新鲜血液为检材的不足,可用于血痕标本的HBV-DNA检测,对大规模的分子流行病学调查及血液银行的建立提供技术支持.
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