CaMKII α/β稳定表达的PC12细胞株的构建及其功能的初步研究

来源 :中国药理学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：josenhu

【摘要】

：

目的建立稳定表达CaMK II α/β的PCI2稳定细胞株，以便进一步研究钙／钙调素依赖性蛋白激酶CaMKⅡα/β不同亚型的生理功能。方法通过脂质体介导的方法将构建的表达载体pEGFP-Ca

【作者】

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张蕊苑玉和赵明陈乃宏

【机构】

：

中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,天津中医药大学

【出处】

：

中国药理学通报

【发表日期】

：

2011年12期

【关键词】

：

钙-钙调素依赖性蛋白激酶CaMKⅡα/β 稳定细胞株突触囊泡蛋白的表达神经递质DA释放融合蛋白高效液相检测 calcium-calmodulin-dep

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金资助项目（No30973887,81073078,81073130）,国家创新药物重大专项资助项目（No2008ZX09101,2009ZX09303,2009ZX09301,2009ZX09303）,国家自然科学基金广东自然科学联合基金资助项目（NoU0832008）

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目的建立稳定表达CaMK II α/β的PCI2稳定细胞株，以便进一步研究钙／钙调素依赖性蛋白激酶CaMKⅡα/β不同亚型的生理功能。方法通过脂质体介导的方法将构建的表达载体pEGFP-CaMK IIα/β转染入PCI2细胞中，然后用含G418抗生素的选择性培养基进行长期筛选，挑取耐药单克隆，培养并收集耐药的单克隆细胞；通过MTT法检测转染细胞在体外对PC12细胞增殖与活性的影响；Western blot分析稳定表达的pEGFP—CaMKⅡ α/β不同亚型对PC12细胞中相关突触囊泡蛋白表达的影响；并用高

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