CAT为报告基因的铜绿假单胞菌启动子文库的建立及初步鉴定

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以CAT(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)为报告基因,构建p CAT2启动子探针载体从绿脓杆菌基因文库中筛选启动子。Sau3AⅠ酶切铜绿假单胞菌的基因组,回收(500-1 500 bp)片段并与p CAT2载体连接构建铜绿假单胞菌的基因组文库,PCR鉴定文库的多样性,利用氯霉素(10μg/m L)和卡那霉素(50μg/m L)双抗平板筛选了16株阳性菌株,并用PCR、测序、NCBI比对进行鉴定。构建的基因文库的库容量可达50 000个,覆盖基因全长的3.5倍,插
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