【摘 要】
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为深入了解鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的结合位点,在此前报道的鼠伤寒沙门菌GcvB调控基因基础上,本试验首先通过对部分显著调控基因进行荧光定量PCR引物的设计与合成,然
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物疫病研究所,贵州贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物疫病研究所,贵州贵阳550025;贵州省动物疫病与兽医
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为深入了解鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB与靶基因的结合位点,在此前报道的鼠伤寒沙门菌GcvB调控基因基础上,本试验首先通过对部分显著调控基因进行荧光定量PCR引物的设计与合成,然后利用无痕基因重组技术分别构建鼠伤寒沙门菌gcvB基因R1、R2和R3功能基序缺失菌株,最后通过荧光定量PCR技术检测各基因在鼠伤寒沙门菌野生型菌株、gcvB基因缺失株、gcvB R1基因缺失株、gcvB R2基因缺失株和gcvBR3基因缺失株中对数期转录水平变化.PCR扩增及测序结果显示,gcvB基因R1、R2和R3基序已被分别敲除且未留下冗余序列.荧光定量PCR检测结果显示,fhuA、aphA、STM2714、STM0298和 STM1827基因在 gcvB、gcvBR1、gcvBR2或 gcvB R3单敲除时转录水平均显著下调,STM0276、exbD和sodA基因在gcvB、gcvBR1或gcvB R2单敲除时转录水平均显著下调,trpE和yifK基因则在gcvB或gcvB R3单敲除时转录水平均显著上调.以上结果表明,GcvB正调控fhuA、aphA、STM2714、STM0298和STM1827基因可能与R1、R2或R3基序相关,正调控STM0276、exbD和sodA基因可能与R1或R2基序相关,负调控trpE和yifK基因与R3基序有关.
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