【摘 要】
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环境温度变化能显著影响桂花(Osmanthus fragrans)的花芽分化和开放,为了明确SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)基因和miR156(microRNA156)响应环境温度变化对桂
【机 构】
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浙江农林大学风景园林与建筑学院,杭州311300;浙江农林大学浙江省园林植物种质创新与利用重点实验室,杭州311300;浙江农林大学南方园林植物种质创新与利用国家林业和草原局重点实验室,杭州31130
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环境温度变化能显著影响桂花(Osmanthus fragrans)的花芽分化和开放,为了明确SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)基因和miR156(microRNA156)响应环境温度变化对桂花花芽分化的调控,本研究以桂花品种堰虹桂(O.fragransYanhonggui)为材料,克隆得到了10个OfSPL基因(OfSPL1A:MT756841;OfSPL1B:MT756842;OfSPL5:MT756843;OfSPL6:MT756844;OfSPL7:MT756845;OfSPL8:MT756849;OfSPL10:MT756846;OfSPL11:MT756847;OfSPL12:MT756848;OfSPL13:MT756850),运用qRT-PCR对OfSPLs和miR156在不同花芽分化阶段的表达特异性进行分析.通过序列分析发现克隆得到OfSPLs cDNA序列长为1004～3824 bp,编码232～1006个氨基酸,OfSPLs均含有保守的SBP结构域;系统进化分析表明桂花OfSPLs基因与木犀科油橄榄(Olea europaea)OlSPLs基因具有较近的亲缘关系.另外,通过生物信息学分析发现,10个OfSPL基因均定位于细胞核内;miR156通过抑制翻译或降解来调节SPL基因表达发挥作用,对OfSPL基因的miRNA结合位点分析发现,OfSPL6、OfSPL10、OfSPL11、OfSPL12具有与miR156作用的位点.在桂花花芽分化的不同时期,与常温25℃相比,只有OfSPL1A、OfSPL5、OfSPL6、OfSPL10和OfSPL13在环境低温19℃下表达量显著增加,另外也发现miR156-1和miR156-2在19℃的表达显著低于25℃,说明环境低温可能抑制了miR156的表达,进而促进了OfSPL6和OfSPL10的上调使花芽分化进程加快;OfSPL1A、OfSPL5和OfSPL13也同时参与了环境低温下桂花的生长发育,但是并不受到miR156的调控.本研究可为进一步探讨环境温度调控桂花花芽分化和花期提供参考依据.
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