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目的:建立与应用多种探针的 RT-PCR分析 H5N1病原体的检测方法体系。方法通过 GenBank发表的基因序列分析,针对保守区分别设计并合成2对特异性引物(P1/P2,P3/P4)。通过对扩增条件的优化,建立了检测两种病毒的快速双重PCR方法。结果合适引物浓度:P1/P2为0.32μmol/L,P3/P4为0.96μmol/L。双重检测的最小病毒核酸量为2 ng/μl,H5N1病原体混合液在相对应位置出现特异性条带,而其他病毒及空白对照均未出现条带。结论多种探针的RT-PCR分析对于 H5N1病原体检