猪伪狂犬病毒变异株HN1201 gB蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

来源 :河南农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wyn6098

【摘要】

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为获得用于伪狂犬病毒(PRV)临床检测和实验室研究所需的PRV gB特异性抗体,以PRV变异病毒株PRV HN1201免疫小鼠,取免疫后小鼠脾脏细胞与SP/20细胞融合,制备抗PRV gB蛋白的单克

【作者】

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程璇付朋飞杜永坤褚贝贝杨国宇王江

【机构】

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河南农业大学/农业部动物生化与营养重点开放实验室

【出处】

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河南农业科学

【发表日期】

：

2020年10期

【关键词】

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伪狂犬病毒变异株HN1201 gB蛋白单克隆抗体 Western blot 免疫过氧化物酶单层细胞试验间接免疫荧光试验 Pseudorabies virus

【基金项目】

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国家转基因新品种培育重大专项(2016ZX08006001-006),河南省优势特色学科建设项目(203/18xk0102)

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为获得用于伪狂犬病毒(PRV)临床检测和实验室研究所需的PRV gB特异性抗体,以PRV变异病毒株PRV HN1201免疫小鼠,取免疫后小鼠脾脏细胞与SP/20细胞融合,制备抗PRV gB蛋白的单克隆抗体。经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)筛选出1株稳定分泌PRV gB蛋白抗体的单克隆细胞系,经鉴定该细胞系所分泌抗体为IgG1亚型,腹水纯化抗体的IFA效价为2^-11;细胞培养上清和腹水纯化抗体用于Western blot的最佳稀释比分别为1∶50和1∶5000;杂交瘤细

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