【摘 要】
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目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale类受体激酶(receptor-like kinase,RLK)基因,命名为DoR LK(GenBank注册号ANC68272.1)。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术
【机 构】
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陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心; 陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31600320);陕西省高校科协青年人才托举计划项目(20170208);陕西省社会发展科技攻关项目(2018SF-338);陕西省普通高校青年杰出人才计划项目;陕西中医药大学“秦药”品质评价及资源开发学科创新团队项目;陕西中医药大学“思邈青年学者”项目
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目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale类受体激酶(receptor-like kinase,RLK)基因,命名为DoR LK(GenBank注册号ANC68272.1)。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术获取基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用软件DNASTAR 6.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助定量PCR检测基因表达模式。结果 DoR LK基因cD NA全长1 715 bp,编码1条由423个氨基酸组成的多肽,相对分子质量47 800.88,等电点为9.47。DoR LK蛋白包含RLK蛋白家族的1个蛋白激酶结构域(85～370)和一个跨膜基序(250～270)。DoR LK基因与多种植物RLK基因相似性很高(43.62%～63.35%),与小兰屿蝴蝶兰、海枣、芦笋等植物亲缘关系较近。DoR LK基因具有组织表达特异性,其转录本在石斛根中表达量较高,分别为叶和茎中的2.22、2.75倍。结论 DoR LK基因的分子鉴定为进一步揭示RLK在铁皮石斛与环境互作中的功能奠定基础。
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