细胞色素P450 4F2基因的克隆、突变、表达和纯化

来源 :中国分子心脏病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tshanyf
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目的构建人细胞色素P450 4F2基因野生型、V81G和V433M突变型表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化出CYP4F2蛋白。方法用RT—PCR方法从人肾脏总RNA中逆转录扩增CYP4F2,将其插入克隆载体pMD18-T Simple Vector中,将测序鉴正确的CYP4F2基因N、C端改造,克隆构建重组表达载体pCWori+-CYP4F2(His)4-WT。同时采用重叠PCR定点突变法构建pCWori+-CYP4F2 V81G(His)4和pCWori+-CYP4F2 V433M(His)4表达载体,分
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