【摘 要】
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目的观察改良型无血清培养基对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)生物学特性的影响。方法采用组织块贴壁法从健康足月胎儿脐带中分离hUC-MSCs,用10%胎牛血清+DMEM/F12培养基(胎牛
【机 构】
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西安超越干细胞科技有限公司; 陕西圆梦生命科学研究院有限公司; 昆明理工大学灵长类转化医学研究院;
【基金项目】
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国家重点研发计划(2018YFA0108502);云南省重大科技专项计划(2018ZF007-02);陕西省自然科学基础研究计划(2019JQ-997);陕西卫生健康科研基金项目(2018E004)
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目的观察改良型无血清培养基对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)生物学特性的影响。方法采用组织块贴壁法从健康足月胎儿脐带中分离hUC-MSCs,用10%胎牛血清+DMEM/F12培养基(胎牛血清组)、MSCs无血清培养基(无血清1组)、OptiVitro MSC SFM-XF培养基(无血清2组)培养。采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测免疫表型,诱导分化实验检测多向分化潜能,CCK-8法检测细胞增殖情况,免疫学反应检测淋巴细胞亚群。结果胎牛血清组细胞呈梭形,漩涡状生长;无血清1组细胞体积较小,短梭形,呈无规则生长;无血清2组细胞体积较小,短梭形,呈漩涡状生长。三组细胞均表达CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD34、CD19、CD11b、CD45、HLA-DR。三组细胞均具有成脂、成骨、成软骨诱导分化能力,且组间无统计学差异(P>0.05)。三组细胞生长曲线呈"S"形,无血清2组生长较快。三组CD3~+CD4~+ T细胞、CD3~+CD8~+ T细胞、B细胞、Treg细胞比例和TNF-α水平均无统计学差异(P>0.05)。结论改良型无血清培养基(OptiVitro MSCs SFM-XF培养基)培养的hUC-MSCs符合鉴定标准,且具有较高的增殖能力及细胞活性,可作为临床级hUC-MSCs培养的优选方案。
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