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摘 要:目的:检验蝙蝠葛提取物的高剂量重复给药对小鼠的毒性和蝙蝠葛提取物进行复合处理后的减毒作用对全身毒性和主要脏器及几种血清指标的影响。方法:将小鼠分为三组,将蝙蝠葛提取物、蝙蝠葛提取物的复合物、水按照250mg/kg的量对三组小鼠进行重复灌胃给药。6天后,将所有小鼠解剖,对每只小鼠的胸腺、心脏、脾脏、肾脏、肝脏进行称重,计算脏器系数,并测量血液中白蛋白、肌酐、碱性磷酸酶的含量。结果:蝙蝠葛提取物的复合物可减弱蝙蝠葛提取物对小鼠机体产生的毒性。结论:蝙蝠葛提取物的复合物能够减弱单独高剂量提取物对小鼠机体的毒性作用。
关键词:蝙蝠葛提取物复合物;白蛋白;肌酐;脏器系数;小鼠
众所周知,肿瘤已经成为危害人类生命与健康的重大疾病之一,预防和治疗肿瘤已成为我国卫生战略重点之一。中药来源于自然,被越来越多地应用与防治肿瘤的过程中[1]。
蝙蝠葛,又称蝙蝠藤、金丝钓葫芦、山豆根、黄条香、防己葛等,是防己科蝙蝠葛属下的一个植物种。在我国辽宁、吉林等地均有分布。蝙蝠葛根茎提取物主要包括蝙蝠葛酚性碱,即多种脂溶性生物碱的混合物,以证明其主要成分为蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱(Daurisoline,Ds)[2],蝙蝠葛碱已经研究表明能够抑制肿瘤细胞的增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡,能够逆转肿瘤细胞多药耐药性和能抗肿瘤细胞的浸润和转移[1]。
本短期重复给药试验的目的首先是定型地确认蝙蝠葛提取物的高剂量重复给药时的危险程度和比较其经过特殊方法处理形成的复合物是否具有减少毒性的作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验材料及实验动物
蝙蝠葛提取物由延边大学化学系提供,13只小鼠有延边大学实验动物中心提供,均为雌性。
1.1.2 主要试剂
白蛋白测定试剂盒,肌酐测定试剂盒,碱性磷酸酶测定试剂盒,均为中生北控生物科技有限公司产品。
生理盐水;苦味酸溶液;双蒸水;琥珀酸缓冲液;溴甲酚绿;钨酸蛋白沉淀剂;氢氧化钠;对硝基苯磷酸盐等。
1.1.3 主要仪器
722S型分光光度计(上海佑科)、电子天平、高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)、注射器、灌胃器(小鼠用)、解剖器械、移液器等。
1.2 方法
1.2.1 动物试验:将13只小鼠随机分为三组并编号,每天灌胃。对照组:灌水250mg/kg;蝙蝠葛提取物组:将蝙蝠葛提取物250mg/kg灌胃;蝙蝠葛提取物的复合物组:将蝙蝠葛提取物和某种物质的复合物对小鼠按照250mg/kg的量每天进行灌胃试验。6天后,将全部小鼠处死并解剖,取出脏器,称重,并计算脏器系数。
1.2.2 血清中白蛋白和碱性磷酸酶的测定:按照试剂盒的说明进行。
1.2.3 数据分析:各测定结果以平均值±标准偏差表示,数据用t检验进行差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 小鼠剖检
对剖检后的小鼠脏器进行肉眼观察,观察后发现,实验组小鼠的脏器与对照组小鼠的脏器之间未发现明显的肉眼可见的病理变化。
2.2 蝙蝠葛灌胃对小鼠主要脏器的影响:
剖检后各组的主要脏器称重并计算脏器系数,结果如表1和表2。
表1 小鼠主要脏器重量测定结果
*:p<0.05与对照组比较,差异显著
对实验数据进行方差分析,显示灌胃蝙蝠葛对小鼠主要脏器无显著差异。(p>0.05)
2.3 蝙蝠葛灌胃对小鼠血清中白蛋白,肌酐,碱性磷酸酶浓度的影响。
3 讨论与小结
近年来,随着对蝙蝠葛研究的不断深入,在其药理学研究方面取得了很多的成果,但是关于其临床应用的不良反应报道不多,主要表现在肠道反应[3]。
蝙蝠葛碱在10-49每个mg/kg剂量下没有致突变作用,而是表現出抗突变的作用[4]。
对小白鼠灌胃蝙蝠葛6天后,脏器系数与正常对照组比较差异均不显著,各试验组之间差异也均不显著。这说明灌胃蝙蝠葛复合物对小鼠主要脏器的影响不显著,对脏器无毒性作用。
本试验中,与对照组相比,蝙蝠葛提取物组对小鼠机体有毒性作用,降低了小鼠机体中白蛋白的含量,又使肾小球滤过能力下降,导致血清中肌酐含量上升。蝙蝠葛提取物的复合物组与蝙蝠葛提取物组相比,说明蝙蝠葛提取物的复合物对蝙蝠葛提取物的毒性有抑制作用,提高了小鼠机体内白蛋白的含量,增强了小鼠的免疫力,对肾脏有保护作用,抑制了肌酐含量的升高。
短期重复灌胃蝙蝠葛复合物对小鼠主要脏器的影响不显著,对脏器无毒性作用。蝙蝠葛提取物的复合物对蝙蝠葛提取物高剂量的毒性有抑制作用。
参考文献
[1]张英博,周忠光,仲丽丽,等,蝙蝠葛碱抗肿瘤研究进展[J].中国医学装备,2014,12(11):370-37.
[2]邢殿友.几种常见易混淆中药的鉴别[J].吉林中医药,2007,27(12):53.
[3]孙蓉,王晨,北豆根毒性研究进展,中国药物警戒,2009,6(9),546-551.
[4]李铭,蔡文清,李颖,等蝙蝠葛酚性碱抗突变作用的研究,第三军医大学学报,2006,28(7),697-699.
*通讯作者:崔正云
关键词:蝙蝠葛提取物复合物;白蛋白;肌酐;脏器系数;小鼠
众所周知,肿瘤已经成为危害人类生命与健康的重大疾病之一,预防和治疗肿瘤已成为我国卫生战略重点之一。中药来源于自然,被越来越多地应用与防治肿瘤的过程中[1]。
蝙蝠葛,又称蝙蝠藤、金丝钓葫芦、山豆根、黄条香、防己葛等,是防己科蝙蝠葛属下的一个植物种。在我国辽宁、吉林等地均有分布。蝙蝠葛根茎提取物主要包括蝙蝠葛酚性碱,即多种脂溶性生物碱的混合物,以证明其主要成分为蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱(Daurisoline,Ds)[2],蝙蝠葛碱已经研究表明能够抑制肿瘤细胞的增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡,能够逆转肿瘤细胞多药耐药性和能抗肿瘤细胞的浸润和转移[1]。
本短期重复给药试验的目的首先是定型地确认蝙蝠葛提取物的高剂量重复给药时的危险程度和比较其经过特殊方法处理形成的复合物是否具有减少毒性的作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验材料及实验动物
蝙蝠葛提取物由延边大学化学系提供,13只小鼠有延边大学实验动物中心提供,均为雌性。
1.1.2 主要试剂
白蛋白测定试剂盒,肌酐测定试剂盒,碱性磷酸酶测定试剂盒,均为中生北控生物科技有限公司产品。
生理盐水;苦味酸溶液;双蒸水;琥珀酸缓冲液;溴甲酚绿;钨酸蛋白沉淀剂;氢氧化钠;对硝基苯磷酸盐等。
1.1.3 主要仪器
722S型分光光度计(上海佑科)、电子天平、高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)、注射器、灌胃器(小鼠用)、解剖器械、移液器等。
1.2 方法
1.2.1 动物试验:将13只小鼠随机分为三组并编号,每天灌胃。对照组:灌水250mg/kg;蝙蝠葛提取物组:将蝙蝠葛提取物250mg/kg灌胃;蝙蝠葛提取物的复合物组:将蝙蝠葛提取物和某种物质的复合物对小鼠按照250mg/kg的量每天进行灌胃试验。6天后,将全部小鼠处死并解剖,取出脏器,称重,并计算脏器系数。
1.2.2 血清中白蛋白和碱性磷酸酶的测定:按照试剂盒的说明进行。
1.2.3 数据分析:各测定结果以平均值±标准偏差表示,数据用t检验进行差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 小鼠剖检
对剖检后的小鼠脏器进行肉眼观察,观察后发现,实验组小鼠的脏器与对照组小鼠的脏器之间未发现明显的肉眼可见的病理变化。
2.2 蝙蝠葛灌胃对小鼠主要脏器的影响:
剖检后各组的主要脏器称重并计算脏器系数,结果如表1和表2。
表1 小鼠主要脏器重量测定结果
*:p<0.05与对照组比较,差异显著
对实验数据进行方差分析,显示灌胃蝙蝠葛对小鼠主要脏器无显著差异。(p>0.05)
2.3 蝙蝠葛灌胃对小鼠血清中白蛋白,肌酐,碱性磷酸酶浓度的影响。
3 讨论与小结
近年来,随着对蝙蝠葛研究的不断深入,在其药理学研究方面取得了很多的成果,但是关于其临床应用的不良反应报道不多,主要表现在肠道反应[3]。
蝙蝠葛碱在10-49每个mg/kg剂量下没有致突变作用,而是表現出抗突变的作用[4]。
对小白鼠灌胃蝙蝠葛6天后,脏器系数与正常对照组比较差异均不显著,各试验组之间差异也均不显著。这说明灌胃蝙蝠葛复合物对小鼠主要脏器的影响不显著,对脏器无毒性作用。
本试验中,与对照组相比,蝙蝠葛提取物组对小鼠机体有毒性作用,降低了小鼠机体中白蛋白的含量,又使肾小球滤过能力下降,导致血清中肌酐含量上升。蝙蝠葛提取物的复合物组与蝙蝠葛提取物组相比,说明蝙蝠葛提取物的复合物对蝙蝠葛提取物的毒性有抑制作用,提高了小鼠机体内白蛋白的含量,增强了小鼠的免疫力,对肾脏有保护作用,抑制了肌酐含量的升高。
短期重复灌胃蝙蝠葛复合物对小鼠主要脏器的影响不显著,对脏器无毒性作用。蝙蝠葛提取物的复合物对蝙蝠葛提取物高剂量的毒性有抑制作用。
参考文献
[1]张英博,周忠光,仲丽丽,等,蝙蝠葛碱抗肿瘤研究进展[J].中国医学装备,2014,12(11):370-37.
[2]邢殿友.几种常见易混淆中药的鉴别[J].吉林中医药,2007,27(12):53.
[3]孙蓉,王晨,北豆根毒性研究进展,中国药物警戒,2009,6(9),546-551.
[4]李铭,蔡文清,李颖,等蝙蝠葛酚性碱抗突变作用的研究,第三军医大学学报,2006,28(7),697-699.
*通讯作者:崔正云