【摘 要】
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目的体外观察同型半胱氨酸(HCY)是否促进内皮细胞(EC)衰老及可能的作用机制。方法胶原酶消化法分离新生牛主动脉内皮细胞,随机分成4组,对照组不加HCY,其余3组分别在DMEM培养
【机 构】
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上海市食品药品监督管理局宝山分局,国家食品药品监督管理局保健食品审评中心,第二军医大学东方肝胆外科研究所肿瘤免疫与基因治疗中心
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目的体外观察同型半胱氨酸(HCY)是否促进内皮细胞(EC)衰老及可能的作用机制。方法胶原酶消化法分离新生牛主动脉内皮细胞,随机分成4组,对照组不加HCY,其余3组分别在DMEM培养液中加入HCY,使终浓度为0.1、0.5、1.0mmol/L。连续体外培养30d后,观察细胞形态、衰老相关的β-半乳糖苷酶染色,流式细胞仪检测细胞周期,Southern杂交分析端粒长度,同时检测培养上清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)、丙二醛(MDA)浓度和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性。结果各浓度HCY组与对照组相比,细胞体积增大,胞内颗粒增多;β-半乳糖苷酶染色阳性细胞增多;细胞周期的分布发生改变,表现为G0/G1期细胞增多(P<0.05),S期显著减少(P<0.01);端粒缩短;培养上清中NO浓度降低(P<0.05),ET和Ox-LDL升高(P<0.05);氧化还原指标MDA含量和GSH-Px活性没有明显改变。结论HCY促进体外培养的EC衰老,其作用机制可能与氧化还原无关。
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