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建立了一种用反相高效液相色谱测定井冈霉素A的定量分析方法。使用新型Venusil HILIC液相色谱柱,以乙腈与水不同比例进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,紫外检测波长为210nm。该方法的标准偏差为0.24,变异系数为0.42%,回收率在96.5%～101.8%之间,线性相关系数为0.9987。该方法简便、快速、准确、精密,适用于井冈霉素A的定量分析。