【摘 要】
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构建了以赭曲霉毒素A(OTA)核酸适配体为“裂开型”核酶激活“开关”的化学发光传感器,用于葡萄酒中OTA的高灵敏度检测.K+诱导富含G碱基的寡聚核苷酸折叠成平行G-四链体结构,
【机 构】
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大连理工大学化工学院化学系,精细化工国家重点实验室,大连116024;江西省产品质量监督检测院,南昌330052;清华大学生命有机磷化学及化学生物学教育部重点实验室,北京100084
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构建了以赭曲霉毒素A(OTA)核酸适配体为“裂开型”核酶激活“开关”的化学发光传感器,用于葡萄酒中OTA的高灵敏度检测.K+诱导富含G碱基的寡聚核苷酸折叠成平行G-四链体结构,平行G-四链体与血红素复合生成具有类过氧化物酶活性的核酶,可催化过氧化氢氧化鲁米诺产生化学发光.将OTA核酸适配体序列插入可形成核酶的“裂开型”核酸链中,使核酸适配体成为激活核酶催化活性的“开关”.当体系中不存在OTA时,OTA的核酸适配体呈自由链状,“裂开型”核酶的两段核酸序列距离较远,无法有效形成具有酶活性的复合物,催化活性较低;当OTA存在时,OTA诱导核酸适配体形成反平行G-四链体结构,适配体的两端序列相互杂交,从而拉近“裂开型”核酶的两段核酸序列,使其可形成平行G-四链体结构,并与血红素复合,生成具有明显的类过氧化物酶活性的核酶.以鲁米诺为底物,采用化学发光法实现了OTA的高灵敏检测.本方法的线性范围为0.10～2.00 nmol/L,检出限为0.10 nmol/L.
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