【摘 要】
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目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的设计提供实验依据.方法:利用多种针对HEV NE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的
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目的:探讨噬菌体抗体库的固相筛选条件,为筛选方案的设计提供实验依据.方法:利用多种针对HEV NE2蛋白的特异性噬菌体人源抗体和非特异性噬菌体人源抗体,对噬菌体抗体与抗原的结合时间、抗原包被的浓度、洗涤强度和洗脱方式等多种筛选的条件进行初步探索.结果:阳性噬菌体抗体与抗原反应1 min,就可较好结合,洗涤次数为20～30次、洗涤液的pH为5时,筛选得到的阳性率最高.包被抗原的浓度对筛选的阳性率没有明显影响,用10 mg/L抗原竞争洗脱60 min,可得到较高的阳性率.结论:噬菌体抗体库的筛选是一个非常复杂的过程,其中的各个条件之间有着密切的联系,应该根据具体情况进行调整.
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