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◆摘 要：本实验研究采用分光光度法，用对-二甲氨基苯甲醛作顯色剂检测饲料和动物性食品中磺胺二甲嘧啶的方法。该法的最小检测量可达0.1μg/mg，平均回收率达99.2%，变异系数小于等于5，表明此方法结果准确、离散程度小，且操作简便、快速、试剂消耗少。
◆关键词：饲料;动物性食品;磺胺二甲基嘧啶;检测
由于部分饲养者不遵守休药期的规定，导致磺胺类药物在动物体内蓄积，在畜禽产品中残留。人们食用这些兽药残留量超标的产品后，自身健康会受到不良影响。本实验研究使用对-二甲氨基苯甲醛作显色剂的分光光度法，实验结果说明：此方法操作简便、回收率高、结果快速准确，试剂用量少、费用低，可在基层推广使用。
1.1测定原理
将对氨基苯磺酰胺及酰胺官能团上的氢原子被其它基团取代以后形成的一系列衍生物称为磺胺类药物。芳伯氨基是大多数磺胺类药物都含有的基团，酸性条件下，它能与对-二甲氨基苯甲醛生成有色化合物，即喜夫氏碱。因为在一定浓度范围内的喜夫氏碱的吸光度值符合光吸收定律，所以，能够使用分光光度法来测定其含量。
1.2材料与方法
1.2.1试剂与仪器
1.2.1.1对-二甲氨基苯甲醛 在50mL 95%乙醇中溶解1g化学纯的对-二甲氨基苯甲醛即可。
1.2.1.2磺胺二甲基嘧啶（简称：SM2）应用液：准确称取标准品SM2 配制。
1.2.1.3提取液：于500mL容量瓶中加入247.5mL无水乙醇，同时加入5mL浓盐酸，再用蒸馏水定容至500mL。
1.2.1.4仪器：721型分光光度计。
1.3试验条件的选择
1.3.1提取试剂的选用。因磺胺二甲基嘧啶具有难溶于水、易溶于稀酸和碱等理化性质，所以选用酒精、乙醚、氯仿、盐酸作为提取试剂实验。
1.3.2溶液最大吸收波长的选择（吸收曲线）。标准应用液的配制：用提取试剂溶解精确称量的25mg SM2，并移入100mL容量瓶中，再用提取液定容至100mL，得到SM2溶液的浓度为0.25mg/mL。分别取上述溶液0.5、1.0、3.0、4.5mL置于25mL容量瓶中，同时用提取液定容到刻度，分别得到浓度为0.005、0.010、0.030、0.045mg/mL的SM2标准液。分光光度计灵敏度档选择“3”档、比色皿厚度选用0.5cm，并向标准液中分别加入1mL对-二甲氨基苯甲醛，打开分光光度计，测定上述标准液在不同波长时的吸光度值。以波长λ为横坐标，以吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线。结果表明：四个浓度都在450nm处有最大的吸光度值，所以确定溶液的最大吸收波长为450nm。
1.3.3显色条件选择
1.3.3.1确定显色剂的酸度。首先配制五组浓度为0.01、0.02、0.03、0.04mg/mL的SM2标准液，各组溶液分别加入盐酸含量为0、1、2、3、4mL的对-二甲氨基苯甲醛各1mL作显色剂。然后选择波长450nm测定溶液的吸光度值。横坐标为浓度，纵坐标为吸光度值来绘制标准曲线。结果显示：显色剂中不加入盐酸时，溶液可形成稳定的有色化合物，吸光度值稳定，在一定范围内符合光吸收定律，所以确定显色剂中不加入盐酸，溶液的pH值在4.0-4.5之间。
1.3.3.2确定显色剂的用量。试验结果显示，对-二甲氨基苯甲醛用量为1.0mL时，溶液吸光度值的梯度明显，空白管为0，所以，确定显色剂的用量为1.0mL。
1.3.3.3确定比色皿的厚度。结果显示：在0.5cm厚的比色皿中，溶液的吸光度值在一定范围内符合光吸收定律，所以确定比色皿厚度为0.5cm。
1.3.3.4确定溶液显色时间。配制五管浓度分别为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.03mg/mL的SM2标准液，其他分析条件同上，室温下，分别显色2min、4 min 、6 min、8 min和 10 min后测定溶液的吸光度值。综合三个浓度在不同显色时间的吸光度值，可以看出溶液的颜色在显色6-8min后达到稳定，因此溶液显色时间确定为6-8min。
1.4绘制工作曲线。为方便查出样品中磺胺二甲基嘧啶的含量，可以绘制标准工作曲线。从工作曲线上就可以查出待测样品中磺胺二甲基嘧啶的含量（毫克数）。
2回收率试验
为了验证本实验方法测定结果准确性的高低，做了回收率试验。分别以0.05mg/g，0.1mg/g，0.2mg/g三个浓度在饲料中添加SM2，按照分析方法进行检测，结果见表6。结果显示：SM2浓度在0.05-0.2mg/g范围内均与工作曲线有良好的比例关系，平均回收率在96%～102%。
3结果与讨论
3.1实验表明：用对-二甲氨基苯甲醛作显色剂的分光光度法具有简便、易行、快速的优点，而且试剂消耗量较少，在常温条件下就可以进行测定。
3.2生活中一些物质也含有芳伯氨基，所以如果在待测样品中有含芳伯氨基的物质，可能对磺胺二甲嘧啶的显色产生干扰。这个问题需要注意。
3.3磺胺类药物在动物性食品中的MRL（mg/kg）为：所有食品动物肌肉、脂肪、肝、肾、牛奶、羊奶≤0.1mg/kg。饲料中磷酸泰乐菌素、磺胺二甲基嘧啶预混剂每1000Kg饲料中添加200g，其中泰乐菌素100g、磺胺二甲基嘧啶100g用分光光度法的检出限量很低，该法的最小检测量为：0.1ug/mg，所以可用于饲料和动物性食品中磺胺二甲基嘧啶的检测。
参考文献
[1]张彦明，佘锐萍.动物性食品卫生学[M].第三版，2002，8（77）.
[2]中华人民共和国国家进出口商品检验局.《食品分析大全》第一卷[M].高等教育出版社，1997.
[3]南京药学院.药物分析[M].人民卫生出版社，1980.
[4]胡传训.定量分析化学[M].成都科技大学出版社，1999.
[5]刘珍.化验员读本仪器分析[M].化学工业出版社，1996.
[6]王晶，王林，黄晓蓉.食品安全快速检测技术[M].化学工业出版社，2002.
[7]龚炎长等.鸡饲料配制和使用技术[M].中国农业出版社，2003.
◆关键词：饲料;动物性食品;磺胺二甲基嘧啶;检测
由于部分饲养者不遵守休药期的规定，导致磺胺类药物在动物体内蓄积，在畜禽产品中残留。人们食用这些兽药残留量超标的产品后，自身健康会受到不良影响。本实验研究使用对-二甲氨基苯甲醛作显色剂的分光光度法，实验结果说明：此方法操作简便、回收率高、结果快速准确，试剂用量少、费用低，可在基层推广使用。
1.1测定原理
将对氨基苯磺酰胺及酰胺官能团上的氢原子被其它基团取代以后形成的一系列衍生物称为磺胺类药物。芳伯氨基是大多数磺胺类药物都含有的基团，酸性条件下，它能与对-二甲氨基苯甲醛生成有色化合物，即喜夫氏碱。因为在一定浓度范围内的喜夫氏碱的吸光度值符合光吸收定律，所以，能够使用分光光度法来测定其含量。
1.2材料与方法
1.2.1试剂与仪器
1.2.1.1对-二甲氨基苯甲醛 在50mL 95%乙醇中溶解1g化学纯的对-二甲氨基苯甲醛即可。
1.2.1.2磺胺二甲基嘧啶（简称：SM2）应用液：准确称取标准品SM2 配制。
1.2.1.3提取液：于500mL容量瓶中加入247.5mL无水乙醇，同时加入5mL浓盐酸，再用蒸馏水定容至500mL。
1.2.1.4仪器：721型分光光度计。
1.3试验条件的选择
1.3.1提取试剂的选用。因磺胺二甲基嘧啶具有难溶于水、易溶于稀酸和碱等理化性质，所以选用酒精、乙醚、氯仿、盐酸作为提取试剂实验。
1.3.2溶液最大吸收波长的选择（吸收曲线）。标准应用液的配制：用提取试剂溶解精确称量的25mg SM2，并移入100mL容量瓶中，再用提取液定容至100mL，得到SM2溶液的浓度为0.25mg/mL。分别取上述溶液0.5、1.0、3.0、4.5mL置于25mL容量瓶中，同时用提取液定容到刻度，分别得到浓度为0.005、0.010、0.030、0.045mg/mL的SM2标准液。分光光度计灵敏度档选择“3”档、比色皿厚度选用0.5cm，并向标准液中分别加入1mL对-二甲氨基苯甲醛，打开分光光度计，测定上述标准液在不同波长时的吸光度值。以波长λ为横坐标，以吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线。结果表明：四个浓度都在450nm处有最大的吸光度值，所以确定溶液的最大吸收波长为450nm。
1.3.3显色条件选择
1.3.3.1确定显色剂的酸度。首先配制五组浓度为0.01、0.02、0.03、0.04mg/mL的SM2标准液，各组溶液分别加入盐酸含量为0、1、2、3、4mL的对-二甲氨基苯甲醛各1mL作显色剂。然后选择波长450nm测定溶液的吸光度值。横坐标为浓度，纵坐标为吸光度值来绘制标准曲线。结果显示：显色剂中不加入盐酸时，溶液可形成稳定的有色化合物，吸光度值稳定，在一定范围内符合光吸收定律，所以确定显色剂中不加入盐酸，溶液的pH值在4.0-4.5之间。
1.3.3.2确定显色剂的用量。试验结果显示，对-二甲氨基苯甲醛用量为1.0mL时，溶液吸光度值的梯度明显，空白管为0，所以，确定显色剂的用量为1.0mL。
1.3.3.3确定比色皿的厚度。结果显示：在0.5cm厚的比色皿中，溶液的吸光度值在一定范围内符合光吸收定律，所以确定比色皿厚度为0.5cm。
1.3.3.4确定溶液显色时间。配制五管浓度分别为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.03mg/mL的SM2标准液，其他分析条件同上，室温下，分别显色2min、4 min 、6 min、8 min和 10 min后测定溶液的吸光度值。综合三个浓度在不同显色时间的吸光度值，可以看出溶液的颜色在显色6-8min后达到稳定，因此溶液显色时间确定为6-8min。
1.4绘制工作曲线。为方便查出样品中磺胺二甲基嘧啶的含量，可以绘制标准工作曲线。从工作曲线上就可以查出待测样品中磺胺二甲基嘧啶的含量（毫克数）。
2回收率试验
为了验证本实验方法测定结果准确性的高低，做了回收率试验。分别以0.05mg/g，0.1mg/g，0.2mg/g三个浓度在饲料中添加SM2，按照分析方法进行检测，结果见表6。结果显示：SM2浓度在0.05-0.2mg/g范围内均与工作曲线有良好的比例关系，平均回收率在96%～102%。
3结果与讨论
3.1实验表明：用对-二甲氨基苯甲醛作显色剂的分光光度法具有简便、易行、快速的优点，而且试剂消耗量较少，在常温条件下就可以进行测定。
3.2生活中一些物质也含有芳伯氨基，所以如果在待测样品中有含芳伯氨基的物质，可能对磺胺二甲嘧啶的显色产生干扰。这个问题需要注意。
3.3磺胺类药物在动物性食品中的MRL（mg/kg）为：所有食品动物肌肉、脂肪、肝、肾、牛奶、羊奶≤0.1mg/kg。饲料中磷酸泰乐菌素、磺胺二甲基嘧啶预混剂每1000Kg饲料中添加200g，其中泰乐菌素100g、磺胺二甲基嘧啶100g用分光光度法的检出限量很低，该法的最小检测量为：0.1ug/mg，所以可用于饲料和动物性食品中磺胺二甲基嘧啶的检测。
参考文献
[1]张彦明，佘锐萍.动物性食品卫生学[M].第三版，2002，8（77）.
[2]中华人民共和国国家进出口商品检验局.《食品分析大全》第一卷[M].高等教育出版社，1997.
[3]南京药学院.药物分析[M].人民卫生出版社，1980.
[4]胡传训.定量分析化学[M].成都科技大学出版社，1999.
[5]刘珍.化验员读本仪器分析[M].化学工业出版社，1996.
[6]王晶，王林，黄晓蓉.食品安全快速检测技术[M].化学工业出版社，2002.
[7]龚炎长等.鸡饲料配制和使用技术[M].中国农业出版社，2003.