MUC1粘蛋白的分离纯化及其抗体的制备

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经高速离心从正常人乳中获得人乳汁颗粒膜(HMFGM),产量约0.4g/L。经进一步破碎、脱脂及SepharoseCL-4B柱纯化,获得含MUC1粘蛋白的组分,并经SDS-PAGE、Western-blot及ELISA鉴定后,免疫家兔制备多抗。结果表明,进一步凝胶过滤获得MUC1粘蛋白,行SDS-PAGE后经希夫试剂和考马斯亮蓝染色呈单一条带,表观相对分子质量大于205000。Western-blot及ELISA结果表明可与MUC1特异性抗体结合。制备获得的多抗经ELISA测定效价为1∶64000~1∶128000。表明建立了MUC1粘蛋白的纯化方法,获得的MUC1粘蛋白及其抗体可进一步用于MUC1检测及其功能的研究。
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