论文部分内容阅读
将甲型肝炎病毒龙甲株（LJ）结构蛋白基因（包括部分5′端非编码基因，nt 630-3049）cDNA序列与国外HM175、MBB和LA三个毒株相应区域相比较，结果显示，LJ株结构蛋白基因与MBB株的同源性最高，为96.7%，与HM175和LA的同源率分别为95.4%和91.4%。推导的氨基酸变异率分别为0.91%，0.91%和2.98%。LJ与LA株氨基酸差异在整个结构蛋白区均有分布，而与HM175和MBB的差异仅出现在VP2和VP3区。56种常用限制性内切酶位点分别增加10、13和30个，分别减少15、10和27个，其中BstEⅡ和PvuⅠ各有一个为LJ株所特有的位点，Hind Ⅲ、pst Ⅰ和Sac Ⅰ位点四毒株均一致。将LJ株结构蛋白基因（nt745-2993）置换HM175株相应基因区域，插入pJSA1175表达质粒7.5k启动子下游，经转染和克隆纯化，获得vJSA1175HAV5LJ重组痘苗病毒。用甲型肝炎病毒单克隆抗体包被，ELISA夹心法检测表达产物，效价为1∶16。Western blot分析，表达产物与抗-VP0、抗-VP1和抗-VP1、2、3血清特异性结合的带型与已报道HM175重组病毒株的表达产物及天然甲型肝炎病毒感染细胞所收获的产物带型一致。