【摘 要】
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目的：通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对 T24细胞增殖和迁移的影响。方法T24细胞株分为3组：干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,
【机 构】
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安徽医科大学第二附属医院泌尿外科,合肥,230601合肥微尺度物质科学国家实验室，中国科技大学生命科学院分子细胞遗传学实验室，合肥 230022;
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目的：通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对 T24细胞增殖和迁移的影响。方法T24细胞株分为3组：干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,通过脂质体转染至T24细胞中,应用Western blot法检测转染后T24细胞中Eg5蛋白表达,采用台盼蓝拒染实验检测细胞死亡率,用噻唑蓝( MTT)比色分析法和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制率,通过细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果干扰组Eg5蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组；干扰组细胞死亡率显著升高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义( P<0．05)；干扰组的克隆形成率下降,与空白对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义( P <0．05)；MTT结果提示,干扰Eg5基因表达后,T24细胞的增殖率明显下降(P<0．05)；划痕实验结果显示干扰组细胞迁移能力受到明显抑制(P<0．05)。结论 Eg5基因在膀胱移行细胞癌起重要作用,干扰Eg5基因能有效抑制T24细胞的增殖与迁移,促进细胞死亡,以Eg5为靶点有望成为膀胱癌基因治疗的新基因靶点。
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