【摘 要】
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为建立蜱媒Dabieshan病毒血清学抗体检测方法,本研究基于Dabieshan病毒NP蛋白序列,通过建立原核表达体系并优化反应条件,建立一种可用于检测血清NP抗体的间接ELISA方法.结果 显示,当重组NP蛋白包被浓度为0.23 μg/孔,血清稀释比例为1∶5×104,二抗稀释比例为1∶5000,底物显色时间为15 min时,抗原抗体反应强度最佳.以上述条件建立的间接ELISA方法,与同为白蛉病毒属的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)阳性血清无交叉反应,具有较好的特异性.批内OD450值变异系数小
【机 构】
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南京医科大学附属儿童医院输血科,江苏南京210000;东部战区疾病预防控制中心,江苏南京210000;东部战区疾病预防控制中心,江苏南京210000;南京医科大学附属儿童医院输血科,江苏南京21000
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为建立蜱媒Dabieshan病毒血清学抗体检测方法,本研究基于Dabieshan病毒NP蛋白序列,通过建立原核表达体系并优化反应条件,建立一种可用于检测血清NP抗体的间接ELISA方法.结果 显示,当重组NP蛋白包被浓度为0.23 μg/孔,血清稀释比例为1∶5×104,二抗稀释比例为1∶5000,底物显色时间为15 min时,抗原抗体反应强度最佳.以上述条件建立的间接ELISA方法,与同为白蛉病毒属的发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)阳性血清无交叉反应,具有较好的特异性.批内OD450值变异系数小于10%,重复性较好.结果 表明,本研究建立的间接ELISA方法具有较高的特异性和重复性,可进一步用于Dabieshan病毒携带区的人群及动物血清筛查,为了解该病毒的潜在致病性提供流行病学资料.
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