Ghrelin改善骨骼肌细胞胰岛素抵抗的机制研究

来源 :中华内分泌外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rocklysun
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目的 观察酰化ghrelin和非酰化ghrelin分别对胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)骨骼肌细胞的胰岛素受体后信号通路关键因子PI3Kp85α、Akt/PKB及GLUT4的影响.方法 大鼠L6成肌细胞经棕榈酸诱导分化,建立IR模型成功后入选实验,分为酰化ghrelin组(AG组)、非酰化ghrelin组(UAG组)、PI3K抑制剂(LY)+酰化ghrelin组(LY+ AG组)、LY+非酰化ghrelin组(LY+ UAG组)和对照组(IR-CO组).各组经处理因素干预24 h后,激光共聚焦和流式细胞术检测各组骨骼肌细胞在胰岛素刺激下对荧光葡萄糖的摄取能力,免疫印迹法检测骨骼肌组织的磷酸化/总PI3Kp85α、磷酸化/总Akt、细胞膜/总GLUT4的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测骨骼肌组织PI3Kp85α、Akt、GLUT4 mRNA的表达.结果 L6成肌细胞诱导分化及IR模型建立成功;AG组和UAG组的细胞在胰岛素刺激下的葡萄糖摄取分别是IR-CO组的1.25和1.28倍,磷酸化/总PI3 Kp85α相对蛋白表达量分别是IR-CO组的1.78和1.89倍,磷酸化/总Akt、细胞膜/总GLUT4的蛋白表达是IR-CO组的1.84和1.80倍,细胞PI3Kp85α、Akt/PKB、GLUT4的mRNA表达均较对照组显著升高,LY+ AG组和LY+ UAG组细胞的上述指标较单独使用酰化ghrelin或非酰化ghrelin作用时显著下降.结论 酰化ghrelin和非酰化ghrelin均能改善骨骼肌细胞的IR,增加骨骼肌细胞在胰岛素刺激下的葡萄糖摄取;能够上调骨骼肌细胞的磷酸化PI3Kp85α、磷酸化Akt/PKB、细胞膜GLUT4的相对蛋白表达和3者的mRNA表达,PI3K抑制剂LY294002能够抑制酰化和非酰化ghrelin的上述改善作用。

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