【摘 要】
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目的 观察三焦针法对快速老化模型小鼠(SAMP8)海马神经元细胞骨架重组相关蛋白的影响,探讨针刺治疗阿尔茨海默氏病(AD)的可能细胞生物学机制.方法 以7月龄SAMP8为AD动物模型,
【机 构】
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天津中医药大学第一附属医院针灸部,国家中医针灸临床医学研究中心 天津,300193;天津中医药大学第一附属医院针灸研究所 天津300193
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目的 观察三焦针法对快速老化模型小鼠(SAMP8)海马神经元细胞骨架重组相关蛋白的影响,探讨针刺治疗阿尔茨海默氏病(AD)的可能细胞生物学机制.方法 以7月龄SAMP8为AD动物模型,随机分为对照组、针刺组和非穴组,每组各20只.针刺组给予三焦针法(取穴:膻中、中脘、气海、血海、足三里),非穴组以双侧胁肋下非经非穴点针刺处理,1次/日,连续6日,第7 日休息,连续干预4周.采用Mor-ris水迷宫隐蔽平台试验检测小鼠逃避潜伏期,采用空间探索实验检测小鼠原平台象限停留时间.提取小鼠海马组织脂筏,采用液质联用蛋白质组学方法检测各组小鼠海马脂筏蛋白,分析其中募集的细胞骨架相关蛋白的差异表达;采用免疫荧光共定位法检测各组β-tubulin及Cdc42表达;采用Western Blot法检测各组β-tubulin、β-actin、neurofibrillary蛋白表达.结果 三组小鼠5天逃避潜伏期逐渐缩短(F=8.61,P=0.0048).针刺组逃避潜伏期与对照组和非穴组均有显著差异(P＜0.01).与对照组和非穴组比较,针刺组第3天开始逃避潜伏期时间差异有统计学意义(P＜0.01).针刺组原平台象限停留时间[(19.14± 4.32)S]明显高于对照组[(11.38±3.35)S]和非穴组[(1 3.51±2.46)S],差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,针刺组与非穴组海马脂筏募集的蛋白在种类和数量上存在差异.针刺组脂筏募集的细胞骨架相关蛋白和小G蛋白明显多于非穴组,且表现出同步增多的特点;免疫荧光共定位提示,针刺组β-tubulin与Cdc42在细胞核周以及轴突部位高度富集;与对照组比较,针刺对3种细胞骨架蛋白表达量的影响未显示统计学意义.结论 三焦针法可调节海马神经元细胞骨架重组,这可能是其治疗AD的重要细胞生物学机制之一.
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