烧伤患者血清对单核细胞核因子κB核移位的影响

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目的观察烧伤患者血清(以下称烧伤血清)对单核细胞核因子κB(NF-κB)异二聚体p50、p65核移位及核抑制因子κBα(IκBα)降解的影响,进一步探讨烧伤血清对单核细胞活化的作用. 方法收集体外培养的人外周血单核细胞(PBMC),分别用正常人血清、烧伤血清、烧伤血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激PBMC(依次分为对照组、烧伤血清组、PDTC组),应用激光共聚焦显微镜观察血清刺激30、60、120、480 min后PBMC的p50、p65核移位;采用Western 印迹法检测刺激30、60、90、120 min时PBMC 的IκBα蛋白降解情况. 结果与对照组比较,刺激30 min后烧伤血清组PBMC中p50、p65即发生核移位,30~60 min达高峰,120 min后核内聚集减少,回复至刺激前状态.刺激30 min后烧伤血清组PBMC IκBα发生降解,刺激60 min后含量几乎为零,与对照组比较差异有非常显著性意义(P<0.01),120 min后表达水平逐渐恢复.PDTC组PBMC IκBα降解[刺激60 min后含量为(11.57±1.98)×104积分灰度值]及p50、p65核移位程度比烧伤血清组轻(P<0.01). 结论烧伤血清可导致PBMC IκBα降解和p50、p65核移位,进而活化NF-κB,诱导PBMC分泌细胞因子.PDTC对此变化有抑制作用.

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