【摘 要】
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目的建立血浆中循环DNA的定量检测方法并探讨其在肝细胞癌诊断中的应用价值。方法先提取正常健康人全血DNA,采用PCR方法扩增人球蛋白基因,然后把该内参基因的扩增产物进行梯
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院病理科,中山大学附属第一医院检验医学部,广东省妇幼保健院病理科,南方医科大学南方医院检验科
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目的建立血浆中循环DNA的定量检测方法并探讨其在肝细胞癌诊断中的应用价值。方法先提取正常健康人全血DNA,采用PCR方法扩增人球蛋白基因,然后把该内参基因的扩增产物进行梯度稀释来制备标准品,再用荧光定量PCR方法扩增不同浓度的标准品,从而建立检测血浆循环DNA的标准曲线。然后分别收集肝细胞癌患者术前血浆标本132例、肝硬化患者血浆标本55例,用已建立的方法定量检测这些患者血浆标本中的循环DNA。结果建立了检测血液循环DNA的荧光定量PCR方法,该方法扩增效率较高;其标准曲线的Slope值为-0.308,Intercept值为28.283,R2值为0.997。肝细胞癌患者血浆中DNA浓度为(332±38)ng/m L,显著高于肝硬化患者的(57±6)ng/m L和正常健康人的(15±4)ng/m L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论荧光定量PCR技术可用于检测血液循环DNA浓度。血循环DNA检测对肝细胞癌的诊断具有重要的应用价值。
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