目的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养技术门槛高且重复成功率低,一定程度上制约了相关研究的顺利开展。文中尝试优化全骨髓贴壁法分离培养小鼠BMSCs并探索其诱导分化为肺泡上皮细胞的有效方法。方法采用全骨髓贴壁法培养C57BL/6小鼠胫、股骨骨髓内容物,根据克隆状细胞集落大小及数量,动态调整传代时机与比例进行传代培养。取第6代细胞,计数检测细胞增殖能力,流式细胞术检测相关表面标志物,使用小气道上皮细胞培养基(SAEpi CM)进行诱导分化。结果随着传代次数增加及BMSCs的纯度逐渐提高,第6代细胞增殖速度趋于稳定,流式细胞术分析显示,第6代细胞表达造血干细胞表面标志物CD117的表达率仅为0.008 2%,但高表达骨髓间充质干细胞表面标志物CD29和Sca-1(表达率分别为99.1%和88.5%)。经SAEpi CM培养的BMSCs呈上皮样改变,并表达肺泡细胞的特异表面标志物——肺表面活性物质相关蛋白C。结论根据克隆状细胞集落大小及数量调整传代时间与比例的全骨髓贴壁培养法可有效分离培养得到小鼠骨髓间充质干细胞,并具有分化为肺泡上皮细胞的潜能。