【摘 要】
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目的 探讨SIRT1经p53/bax和NF-κB/过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)途径调控软骨细胞凋亡的作用机制. 方法 常规培养新西兰兔关节软骨细胞,分为3组(n=10):
【机 构】
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518035,广州医学院深圳市第二人民医院创伤骨科518035,广州医学院深圳市第二人民医院中心实验室;
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目的 探讨SIRT1经p53/bax和NF-κB/过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)途径调控软骨细胞凋亡的作用机制. 方法 常规培养新西兰兔关节软骨细胞,分为3组(n=10):SIRT1激活剂(白藜芦醇)组、对照组、SIRT1抑制剂(尼克酰胺)组,用硝普钠诱导细胞凋亡.采用噻唑蓝法检测各组软骨细胞活性及增殖、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和流式细胞术检测各组细胞凋亡,采用Western Blot技术检测各组细胞SIRT1、p53、NF-κB、bax、PGC-1α的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞SIRT1、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达. 结果 SIRT1激活剂组、对照组、SIRT1抑制剂组OD值平均分别为0.139±0.016、0.098±0.006、0.079±0.002,细胞凋亡率平均分别为9.8％±0.7％、27.3％±1.6％、41.9％±2.0％,以上项目3组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).SIRT1激活剂组细胞SIRT1、PGC-1α的表达较对照组增高,而SIRT1抑制剂组较对照组降低;SIRT1激活剂组p53、NF-κB、bax的表达较对照组降低,而SIRT1抑制剂组较对照组升高.SIRT1激活剂组细胞SIRT1、Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖mRNA的表达最高,对照组次之,SIRT1抑制剂组最低. 结论 SIRT1可通过调控p53、NF-κB的表达改变其下游bax、PGC-1α的表达,从而调控软骨细胞的凋亡.
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