论文部分内容阅读
目的
探讨骨癌痛小鼠脊髓神经元微小RNA-212(miR-212)与cAMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化的关系。
方法SPF级雄性C3H/HeJ小鼠32只，4～6周龄，体重20～25 g，采用随机数字表法将小鼠分为4组(n＝8)：假手术组(S组)、骨癌痛组(BCP组)、骨癌痛＋鞘内注射阴性对照锁核酸组(BC组)和骨癌痛＋鞘内注射miR-212反义锁核酸组(BL组)。经股骨远端骨髓腔内注射含2×105个NCTC 2472细胞的α-最小必需培养基20 μl以制备骨癌痛模型。于接种后14 d时，BL组和BC组分别鞘内注射miR-212反义锁核酸和阴性对照锁核酸12 pmol/5 μl，1次/d，连续7 d。S组及BCP组鞘内注射等容量无核酸酶水。于接种前1 d、接种后4、7、10、14、21 d时测定自发抬足次数(NSF)和机械缩足反应阈(MWT)。于接种后21 d痛行为学测定结束后，取脊髓组织，采用Western blot法测定脊髓磷酸化CREB(p-CREB)和CREB的表达水平。
结果与S组相比，BCP组、BC组及BL组接种后7-21 d时MWT降低，NSF增加，脊髓p-CREB表达上调(P<0.05)。与BCP组相比，BL组接种后21 d时MWT升高，NSF减少，脊髓p-CREB表达下调(P<0.05)，BC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。4组脊髓CREB表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论脊髓神经元miR-212可能通过促进CREB磷酸化参与小鼠骨癌痛的维持。