【摘 要】
：
线性聚乙烯亚胺(LPEI)是一类广泛用于核酸转染或药物传递的阳离子聚合物.为了进一步探究25 kDa LPEI的转染条件,通过凝胶电泳阻滞试验评估N/P,聚合pH及聚合时间对LPEI-DNA复
【基金项目】
：
重庆市基础与前沿研究计划项目(cstc2016jcyjA0386);中央高校基本科研业务费(XDJK2018D016)
论文部分内容阅读
线性聚乙烯亚胺(LPEI)是一类广泛用于核酸转染或药物传递的阳离子聚合物.为了进一步探究25 kDa LPEI的转染条件,通过凝胶电泳阻滞试验评估N/P,聚合pH及聚合时间对LPEI-DNA复合物形成的影响,继而利用大范围N/P的25 kDa LPEI对HEK293 T细胞进行绿色荧光蛋白表达质粒转染,转染48 h后通过绿色荧光细胞比例及MTT的统计分析,评估转染效率与LPEI造成的细胞毒性.结果表明, N/P的上升能增强LPEI-DNA的电泳阻滞;随着共孵育pH值从6～8升高, LPEI-DNA聚合逐渐减弱;随着共孵育时间延长, LPEI-DNA聚合逐渐增强,孵育1 h时达到饱和.随着体外转染HEK293 T细胞的N/P升高,转染阳性细胞比例逐渐升高,当N/P达到40～60时转染效率达到最高,进一步提高N/P后转染效率极显著下降(p<0.01);随着N/P升高,细胞活力逐渐下降.结果表明, N/P, pH,聚合时间均可影响LPEI聚合核酸能力;综合考虑N/P对HEK293 T细胞转染效率及细胞毒性的影响,确定25 kDa LPEI转染细胞适宜的条件为N/P为40～60,聚合pH值为6.0,聚合时间为1 h.
其他文献
老龄化背景下的中国经济发展方式转变正在引起热议,通过构建包括老龄化率和少儿抚养比的非齐次需求效用模型,分析人口因素对产业结构的影响。基于产业结构合理化与高级化两个
艺术类大学生作为高校一个特殊群体,面临着日益严峻的就业形势,其就业难成因主要在于艺术类招生规模的扩大导致供求矛盾突出,部分毕业生质量下降;部分学生专业技能不高,且以
高校人事管理体制改革是其内部管理体制改革的重要方面。对当前高校人事管理体制改革进行了分析,认为改革虽然取得了一定成效,但诸多方面仍存在问题,这些也影响和制约着高等
着眼于中国-东盟自由贸易区的建立,论述双方在未来的自由贸易区内开展电子商务合作所涉及网络基础设施、网络支付、网络安全和网络配送等四个方面的初步构想,为将来的电子商
自主性学习是近年来外语教育界研究的热点,本文通过调查西北部地区大学生自主性英语学习能力发现西北地区大学生基本具备了自主性英语学习的能力,但是在具体操作上还存在一些
根据东湖风景区的实际情况,在分析和阐述楚文化所具有的特质的基础上,结合旅游资源的开发规律,运用归纳综述法,提出了将楚文化与东湖风景区有机整合,使楚文化成为东湖风景区
在争取民族解放与人民自由的斗争中,中国共产党领导中国人民创建了红色文化。在中国特色社会主义建设时期,发挥红色文化的载体作用,赋予红色文化时代内涵,创新红色文化传播形
发轫于尼采的反常规之道，非传统“诱惑”颠覆了整个传统理性世界。经过维特根斯坦、海德格尔、拉康、福柯、德里达到鲍德里亚等操劳，非理性、非本质、非概念、非操持、非澄明、
随着社会的发展，科学技术的不断提高，网络应用的越加频繁，为了使网络在应用过程中更加的稳定，就出现了冗余光纤环网。为了在发展中更好的对其进行应用，本文就对冗余光纤环网在工业
介绍±800 kV云广特高压直流工程在极Ⅰ高端阀组调试期间,两台600 k V换流变乙炔异常增长。通过油色谱分析确定内部存在故障,利用超声波进行故障定位,通过现场从检修孔进箱检