目的构建乏氧应答启动子调控的人钠/碘共同转运体（hNIS）报告基因重组质粒,为实体瘤微环境乏氧的实时监测提供研究基础。方法合成乏氧反应元件（HRE）的核苷酸片段,克隆入pGL3-promoter,构建为pGL3-promoter-5×HRE载体。然后将扩增的hNIS基因插入pGL3-promoter-5×HRE载体中,构建为pGL3-promoter-5×HRE-NIS重组质粒并进行测序验证。以DMSO处理组作为对照,CoCl₂处理HEK293细胞模拟乏氧;将经验证的pShuttle-NIS质粒转染HEK293乏氧细胞,同时将构建的pcDNA3.1-HIF-1α质粒和pShuttle-NIS质粒按照3:1比例转染HEK293细胞,转染空质粒pcDNA3.1和pShuttle-NIS质粒组作为对照。通过qRT-PCR法检测hNIS基因表达的变化。并用高锝酸盐(^99mTcO₄^-)处理双质粒共转染的HEK293细胞,洗脱游离^99mTcO₄^-后通过γ计数器采集细胞放射性计数,检测所表达NIS蛋白的功能。结果克隆的基因产物与预期一致,序列无碱基的突变。共转染HIF-1α质粒组及转染pShuttle-NIS的CoCl₂处理组,其hNIS mRNA的表达量显著高于转染空质粒及DMSO处理组（均P<0.01）。共转染HIF-1α质粒组细胞的⁹⁹TcO₄^-摄取率显著高于空质粒对照组（P<0.01）。结论 pGL3-promoter-5×HRE-NIS重组质粒转染后能介导细胞摄取^99mTcO₄^-,为微环境细胞乏氧的核素显像提供实验依据。