原代猪肝细胞的分离获取及培养

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研究猪肝细胞的获取率,活率,观测普通培养过程中肝细胞形态变化过程。方法 取用本地杂种小猪作为肝细胞供体,用Seglen胶原酶二步灌注法,原位灌注分离获取肝细胞悬液,TB染色法计算细胞数及细胞活率,在含100mL/L胎牛血清及其他附助因子的DMEM培养基中培养,光镜下观察培养过程中肝细胞形态变化过程,检测不同时期培养上清中蛋白,尿素的浓度。
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